脱落酸对大鼠学习记忆的影响及可能机理

摘要

脱落酸（ABA）作为关键的植物激素，广泛存在于植物体内，现研究发现ABA也存在于动物（包括人）组织中，且具有多种生物活性。ABA作为类胡萝卜素的直接衍生物，和视黄酸(RA)具有相似的分子结构，研究表明RA可以明显改善啮齿动物的空间记忆能力，但ABA对空间学习与记忆的影响及其分子机制尚不明确。
　　目的:探究ABA给药对成年SD大鼠空间记忆的影响;探究ABA给药对SD大鼠海马树突棘密度及形态的影响，并从NMDA受体、Arc蛋白以及NDR1/2激酶途径来探究其可能的分子机制。
　　方法:1.ABA给药实验:ABA给药剂量分别为5 mg/kg/day、25 mg/kg/day、50 mg/kg/day，给药方式为腹腔注射，给药时间为SD大鼠出生第七天开始一直到第八周进行水迷宫实验的前一天为止;2.Golgi-cox染色:观察ABA给药后海马神经细胞的树突棘形态，通过Western blot及荧光定量PCR检测NMDA受体、Arc蛋白以及NDR1/2激酶的蛋白表达。
　　结果:1.行为学测试发现，中剂量ABA增加了大鼠在目标象限中花费的持续时间和在Morris水迷宫(MWM)的探测测试中进入的频率，并减少了于目标象限的等待时间。2.ABA能引起树突棘结构的显著变化，表现为增加树突棘的形态复杂性、树突棘密度和成熟蘑菇状树突棘数目的增加。3.此外，ABA对NMDA受体R1、R2及Arc蛋白的表达无显著影响，进一步研究发现，ABA能显著提高NDR1/2蛋白及下游基因Rabin3的表达量;离体的原代海马神经元转染NDR1/2 shRNA，研究发现NDR下游基因Rabin3表达的显著降低，即进一步验证了NDR1/2激酶途径参与了ABA对大鼠海马区神经元成熟过程的调节。
　　结论:ABA通过NDR1/2激酶途径调节大鼠海马区神经元树突棘成熟过程，从而增强SD大鼠的学习记忆能力。

目录

声明

摘要

第一章 绪论

1．1 ABA的起源

1．2 ABA生理作用

1．3 ABA的分析检测方法

1．3．1 放射免疫测定(radioimmunoassay，RIA)

1．3．2 高效液相色谱(High Performance Liquid Chromatography，HPLC)

1．3．3 气相色谱法

1．3．4 气相色谱与质谱联用法

1．4 海马与学习记忆

1．5 树突棘与学习记忆

1．5．1 树突与树突棘

1．5．2 树突棘与突触

1．5．3 树突棘生成的调控机制

1．6 课题研究背景、意义和主要内容

第二章 脱落酸ABA对SD大鼠空间记忆的影响

2．1 材料与试剂

2．1．1 主要仪器

2．1．2 主要试剂

2．1．3 实验动物

2．1．4 溶液配制

2．2 实验方法

2．2．1 水迷宫行为学实验

2．2．2 Golgi-cox染色

2．2．3 数据分析

2．3 实验结果

2．3．1 ABA给药期间的体重

2．3．2 ABA给药对SD大鼠学习记忆的影响

2．3．3 ABA给药对SD大鼠海马树突棘形态的影响

2．4 讨论

第三章 ABA给药影响树突棘生长发育的分子机制

3．1 材料与试剂

3．1．1 主要仪器

3．1．2 主要试剂

3．1．3 实验动物

3．1．4 溶液配制

3．2 实验方法

3．2．1 Western blot蛋白定量

3．2．2 荧光定量PCR

3．2．3 海马神经元转染

3．2．5 数据分析

3．3 实验结果

3．3．1 ABA给药对SD大鼠大脑神经元突触后NMBA受体的影响

3．3．2 ABA给药对SD大鼠大脑中Arc的影响

3．3．3 ABA给药对SD大鼠大脑中NDR1／2激酶的影响

3．4 讨论

参考文献

硕士期间的学术活动及研究成果