声明
缩略词表
引言
第一章 文献综述
1.1 植物与干旱胁迫
1.1.1 干旱胁迫对植物的伤害
1.1.2 植物对干旱胁迫的应答
1.2 茉莉酸类物质的合成与代谢
1.3 茉莉酸信号通路的作用机制
1.3.1 茉莉酸信号的受体
1.3.2 茉莉酸信号的效应
1.3.3 茉莉酸信号调控的转录因子
1.4 茉莉酸类物质对植物的生理效应
1.4.1 对植物生长发育的影响
1.4.2 在逆境胁迫中的作用
1.5 茉莉酸诱导蛋白
1.6 核糖体失活蛋白
1.6.1 RIPs种类及基本特征
1.6.2 RIPs与核糖体的相互作用
1.6.3 RIPs与茉莉酸甲酯的作用关系
1.6.4 RIP基因的表达模式
1.6.5 RIPs在植物抗逆方面的作用
1.7 本研究的目的与意义
第二章 小黑麦TwRIP1基因克隆与生物信息学分析
2.1 实验材料、试剂与仪器设备
2.1.2 实验试剂
2.1.3 主要仪器设备
2.2 实验方法
2.2.1 基因组DNA的提取
2.2.2 总RNA的提取
2.2.3 基因组DNA和总RNA的纯度及质量检测
2.2.4 反转录cDNA的合成及PCR检验
2.2.5 拟克隆序列的验证
2.2.6 目的基因生物信息学分析
2.3 结果分析
2.3.1 小黑麦叶片基因组DNA和总RNA质量
2.3.2 小黑麦TwRIP1基因序列的扩增
2.3.3 小黑麦TwRIP1基因的生物信息学分析
2.4 讨论
第三章 小黑麦TwRIP1基因的表达模式分析
3.1 实验材料、试剂与仪器设备
3.1.1 实验材料
3.1.2 实验试剂
3.1.3 主要仪器设备
3.2 实验方法
3.2.1 田间种植及处理
3.2.2 室内种植及处理
3.2.3 总RNA的提取及cDNA的合成
3.2.4 实时荧光定量PCR引物设计
3.2.5 目的基因PCR扩增
3.2.6 数据统计分析
3.3 结果分析
3.3.1 干旱胁迫下小黑麦TwRIP1基因在不同组织中的表达量
3.3.2 不同处理下小黑麦TwRIP1基因的表达模式
3.4 讨论
第四章 BSMV-VIGS介导TwRIP1基因沉默功能分析
4.1 实验材料、试剂与仪器设备
4.1.1 实验材料
4.1.2 实验试剂
4.1.3 主要仪器设备
4.2 实验方法
4.2.1 小黑麦TwRIP1基因BSMV病毒诱导载体构建
4.2.2 转化根癌农杆菌感受态细胞
4.2.3 工程菌悬浮液侵染本氏烟草
4.2.4 摩擦接种小黑麦
4.2.5 沉默了TwRIP1基因的小黑麦处理
4.2.6 小黑麦TwRIP1基因表达量及生理指标测定
4.2.7 数据统计分析
4.3 结果分析
4.3.1 BSMV-VIGS重组载体构建
4.3.2 BSMV-VIGS沉默小黑麦中的TwRIP1基因
4.3.3 沉默TwRIP1基因的小黑麦对外源MeJA的反应
4.3.4 沉默TwRIP1基因的小黑麦对干旱胁迫反应
4.4 讨论
第五章 拟南芥和小麦遗传转化
5.1 实验材料、试剂与仪器设备
5.1.1 实验材料
5.1.2 实验试剂
5.1.3 主要仪器设备
5.2 实验方法
5.2.1 小黑麦TwRIP1基因过表达载体构建
5.2.2 转化根癌农杆菌感受态细胞
5.2.3 工程菌悬浮液侵染拟南芥
5.2.4 农杆菌介导转化小麦幼胚
5.3 结果分析
5.3.1 过表达载体构建
5.3.2 转基因拟南芥的筛选及鉴定
5.3.3 转基因小麦的筛选及鉴定
5.4 讨论
第六章 结论与展望
6.1 小黑麦TwRIP1基因CDS全长克隆
6.2 TwRIP1基因的表达模式
6.3 TwRIP1基因的抗旱功能
6.4 转TwRIP1基因的小麦植株
6.5 小黑麦TwRIP1提高抗旱性的可能机制
6.6 展望
参考文献
附录
致谢
作 者 简 介
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