温度和固定化黑曲霉对人参不定根中人参皂苷含量的调控研究

目录

声明

摘要

1前言

1．1药用植物组织培养研究进展

1．1．1反应器大规模培养

1．1．2药用植物快速繁殖

1．1．3组织培养体系的构建以及培养条件的优化

1．1．4不同组织培养物中化学成分的比较

1．1．5转录组学、蛋白组学、代谢组学分析

1．1．6基因调控

1．2温度调控对植物生理及次级代谢产物积累的影响

1．3诱导子在组织培养中的应用

1．3．1诱导子的作用机制

1．3．2非生物诱导子在药用植物组织培养中的应用

1．3．3生物诱导子在药用植物组织培养中的应用

1．3．4生物诱导子和非生物诱导子的联合使用

1．3．5黑曲霉作为诱导子对次级代谢产物积累的影响

1．4．1人参组织培养研究进展

1．4．2人参皂苷的生物合成

1．4．3人参皂苷的代谢调控研究

1．5立题依据及本项研究的意义

2材料与方法

2．1材料

2．2主要试剂

2．3实验仪器

2．4．1温度处理和实验设计

2．4．2低温处理人参不定根的转录组测序

2．4．3不同处理黑曲霉(Aspergillus niger)对人参不定根中人参皂苷含量的影响

2．4．4不同处理乳酸对人参不定根中皂苷含量积累的影响

2．4．5乳酸对人参不定根中信号分子、转录因子、抗性基因以及功能基因的影响

2．5分析方法

2．5．1人参不定根鲜重的测定

2．5．2人参皂苷含量以及种类的测定

2．5．1信号分子的检测

2．5．4转录因子、抗性基因以及功能基因的表达

2．5．5基因系统发育分析

2．5．6发酵液中产物的检测

2．5．7统计分析

3结果与讨论

3．1温度对人参不定根生长与人参皂苷含量积累的影响

3．1．1温度对人参不定根生长及人参皂苷积累的影响

3．1．2温度对内激素赤霉素(GA3)、乙烯(ETH)、生长素(IAA)以及细胞分裂素合成的影响

3．1．3低温对人参不定根生长及人参皂苷积累的影响

3．1．4 HPLC-ESI-Msn分析低温处理人参不定根后皂苷种类的变化

3．1．5低温对人参皂苷生物合成相关基因以及转录因子表达的影响

3．1．6相关性分析

3．1．7小结

3．2低温处理人参不定根的转录组测序

3．2．1低温处理人参不定根的基因功能注释

3．2．2低温处理人参不定根的差异基因筛选

3．2．3参与人参皂苷生物合成与低温响应的转录因子

3．2．4参与人参皂苷生物合成的基因分析

3．2．5参与三萜皂苷生物合成基因的分析

3．2．6小结

3．3黑曲霉作为诱导子对人参不定根中人参皂苷含量积累的影响

3．3．1不同处理黑曲霉作为诱导子对人参不定根皂苷含量积累的影响

3．3．2固定化诱导子代谢物分析

3．3．3黑曲霉代谢物乳酸对人参不定根中人参皂苷含量的影响

3．3．4乳酸对信号分子表达的影响

3．3．5乳酸对转录因子和抗性基因表达的影响

3．3．5乳酸对功能基因表达的影响

3．3．6小结

4结论

5展望

参考文献

7硕士期间发表论文及申请专利情况

致谢