莱茵衣藻BBS5蛋白的原核表达、纯化及多克隆抗体的制备

目录

声明

摘要

1 前言

1．1莱茵衣藻

1．1．1简介

1．1．2研究进展

1．2纤毛

1．2．1纤毛结构

1．2．2纤毛功能与纤毛病

1．3纤毛运输机制

1．3．1 IFT系统简介

1．3．2 IFT蛋白

1．3．3 BBS蛋自

1．4 BBS5的研究现状

1．5大肠杆菌原核表达系统

1．6本课题的研究内容及意义

2．1．1仪器与设备

2．1．2菌种与质粒

2．1．3药品与试剂

2．1．4培养基

2．1．5相关溶液的配制

2．2实验方法

2．2．1莱茵衣藻bbs5的生物信息学分析

2．2．2莱茵衣藻bbs5目的基因的获得

2．2．3原核表达载体的构建

2．2．4融合蛋白的表达

2．2．5融合蛋白的纯化

2．2．6免疫与抗血清效价检测

2．2．7抗体的鉴定与纯化

3结果与讨论

3．1．1 bbs5的核苷酸与氨基酸序列

3．1．2 BBS5的理化性质

3．2．1模板DNA的获得

3．2．2 bbs5目的基因的获得

3．3原核表达载体的构建

3．3．2重组质粒pET-28a(+)-bbs5和pMAL-C2X-bbs5的验证

3．4融合蛋白的表达

3．4．2 pMAL-28a(+)-bbs5融合蛋白的表达

3．5融合蛋白的纯化

3．5．1 6×His-BBS5融合蛋白的纯化

3．5．2 MBP-BBS5融合蛋白的纯化

3．6免疫与抗血清效价检测

3．7抗体的鉴定与纯化

3．7．1莱茵衣藻样品的定量

3．7．2 BBS5抗体的Protein A纯化

3．7．3 BBS5抗体的抗原抗体亲和纯化

3．7．4抗体的专一性检测

4结论

4．1全文总结

4．2论文的创新点

4．3论文的不足之处

5 展望

参考文献

致谢