声明
致谢
摘要
符号说明
第一章绪论
1．1乳腺癌发展现状
1．1．1乳腺癌已经成为女性最易患的癌症类型
1．1．2女性乳腺癌发病率及死亡率与人口发展指数关系
1．1．3中国女性乳腺癌发展现状
1．2女性乳腺癌类型
1．2．1乳腺癌分型及所占比例
1．2．2雌激素受体分类
1．2．3人表皮生长因子受体2
1．3乳腺癌的治疗选择
1．4清道夫受体家族成员CD36蛋白
1．5选题依据
第二章实验材料与方法
2．1．1细胞系
2．1．2质粒
2．1．3感受态细胞
2．1．4实验耗材
2．1．5细胞培养试剂
2．1．6实验药物
2．1．7免疫印迹与荧光抗体
2．1．8其他试剂
2．1．9实验仪器
2．2细胞培养实验方法
2．2．1细胞复苏
2．2．2细胞传代
2．2．3细胞冻存
2．2．4细胞培养
2．3蛋白质印迹法
2．3．1蛋白质提取
2．3．2蛋白浓度测定
2．3．3制各样品
2．3．4电泳
2．3．5转膜
2．3．6孵育抗体结合
2．4 mRNA检测实验流程
2．4．1细胞总RNA的提取
2．4．2反转录PCR
2．4．3 qRT-PCR荧光定量分析
2．5．1引物设计
2．5．2 CD36目的基因片段的获取
2．5．3酶切酶连反应
2．5．4转化
2．5．5菌液保存及测序
2．6 CD36的siRNA构建
2．7其他实验方法
2．7．1 MTT检测细胞生存实验
2．7．2免疫荧光染色
2．7．3 Transwell细胞侵袭实验
2．7．4 FACS检测细胞周期实验
2．8统计学方法
第三章实验结果与分析
3．1．1 CD36高表达降低患者预后生存率
3．1．2乳腺癌不同类型细胞系中CD36的表达
3．1．3 CD36促进乳腺癌细胞的增殖作用
3．1．4在乳腺癌细胞中siCD36促进细胞凋亡
3．1．5 CD36促进乳腺癌细胞进入S期
3．1．6 CD36促进乳腺癌细胞迁移能力
3．2 CD36增加乳腺癌增殖迁移相关基因表达
3．2．1 CD36敲减抑制细胞增殖与迁移基因表达
3．2．2 CD36过表达促进细胞增殖与迁移基因表达
3．3 CD36激活ERα与ERK1／2信号通路
3．3．2 MDA-MB-231细胞中CD36激活ERK1／2磷酸化
3．3．3 CD36激活ERα通路下游靶基因
3．4 Tamoxifen降低CD36表达抑制MCF-7细胞生长
3．4．1 MCF-7细胞中Tamoxifen降低CD36蛋白表达
3．4．2巨噬细胞中Tamoxifen抑制CD36而激活p-ERK1／2
3．4．3 MDA-MB-231细胞中Tamoxifen不影响CD36与p-ERK1／2
3．5 CD36高表达降低Tamoxifen敏感性
3．5．1 CD36降低Tamoxifen对MCF-7细胞的抑制作用
3．5．2 MCF-7细胞中CD36降低Tamoxifen对p-ERK1／2的抑制作用
3．5．3 CD36过表达降低Tamoxifen对Ki-67的抑制作用
3．6 CD36参与调控MCF-7细胞中Tamoxifen耐受
3．6．1 MCF-7／TAMR细胞CD36高表达
3．6．2 MCF-7／TAMR细胞中敲减CD36部分恢复细胞对Tamoxifen敏感性
3．6．3 CD36封闭抗体抑制乳腺癌细胞增殖
第四章讨论与结论
4．1结果讨论
4．1．3 CD36通过脂肪酸吸收从而促进肿瘤的发生发展
4．1．5 CD36表达与MCF-7细胞Tamoxifen耐受有关
4．2实验结论
4．3课题意义
参考文献
攻读硕士学位期间的学术活动及成果清单
