流体剪切力对体外培养的鼠破骨细胞形态和空泡型质子泵mRNA的影响

摘要

口腔科学中，缺牙修复，正畸牙移动，牙周重建及拔牙创的愈合等均涉及到骨代谢。颌骨处在一个不断动态改建的过程中，骨重建不但包括成骨细胞的新骨形成，同时还包括破骨细胞的旧骨吸收。当破骨细胞数量增多、活性增强，将会导致骨吸收增加，往往会出现牙根吸收松动等方面的疾病；反之，破骨细胞数量减少、活性降低又会导致骨吸收减慢，通常会出现牙萌出障碍等方面的疾病。在骨吸收过程中，破骨细胞被各种刺激因素(主要是应力)激活后，胞内的空泡型质子泵通过转运H<'+>而达到骨基质的酸破坏，从而形成骨吸收陷窝。由此可见，破骨细胞空泡型质子泵在骨改建过程中具有重要的作用。然而，由于破骨细胞是一种终末分化的细胞，存在培养、检测、存活时间短、细胞数量少及无细胞株等局限性，大大限制了破骨细胞的研究。目前尚未检索到流体剪切力对破骨细胞空泡型质子泵mRNA影响的研究报道。 [目的]本研究旨在对鼠破骨细胞的体外培养鉴定和流体剪切力作用下细胞形态学及空泡型质子泵mRNA的变化作一探讨。 [方法]本研究通过动物长骨机械分离法获得破骨细胞，进行培养鉴定后，对破骨细胞施加剪切应力，观察细胞形态学变化，并用实时荧光精确定量聚合酶链式反应检测空泡型质子泵mRNA的表达水平。 [结果]①SD一大鼠后肢长骨的机械分离法可获得足够的破骨细胞，并能满足破骨细胞相应的形态学及功能学的鉴定标准。②随着培养时间的延长，破骨细胞数在达72h后明显减少。③破骨细胞空泡型质子泵ATP6V1a1及TcIRGlmRNA的表达存在时间效应，均在培养24h后达到峰值，至72h后，表达量急剧下降。④随着流体剪切力作用时间的增加和作用强度的增大，SD-大鼠破骨细胞的形态呈波动性变化，直径和面积均有增大的趋势。⑤随着流体剪切力强度的增大，破骨细胞空泡型质子泵ATP6vlal、TcIRGlmRNA的表达水平有增加的趋势。⑥随着流体剪切力作用时间的延长，破骨细胞空泡型质子泵ATP6vlal、TcIRGl mRNA表达水平有增加趋势；但随着流体剪切力作用时间的继续延长，破骨细胞ATP6vlal、TcIRGlmRNA的表达水平出现下降的趋势。

目录

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缩略词表

前 言

试验一鼠破骨细胞的培养和鉴定

试验二破骨细胞空泡型质子泵mRNA表达的时间效应

试验三流体剪切力作用下破骨细胞的形态学分析

试验四流体剪切力对破骨细胞空泡型质子泵mRNA的影响

全文总结

参考文献

综述 破骨细胞空泡型质子泵的研究进展

附 图

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致 谢