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益生菌对铅致学习记忆损伤的修复效应及其机理研究

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摘要

第一章绪论

1.1益生菌

1.1.1益生菌的分类

1.1.2益生菌的益生效应

1.1.3益生菌制剂应用现状

1.2.1神经退行性疾病

1.2.2学习记忆及损伤

1.2.3铅的神经毒性

1.2.4肠道微生物与神经系统的关联

1.3课题背景意义及内容

1.3.1研究背景和意义

1.3.2研究内容

1.3.3技术路线图

第二章益生菌对肠道菌群结构及学习记忆损伤的修复作用

2.1实验材料

2.1.1主要仪器

2.1.2主要试剂和药品

2.1.3相关引物

2.1.4实验动物及样品采集

2.1.5实验菌株

2.2实验方法

2.2.1提取粪便总DNA

2.2.2绝对荧光定量聚合酶链式反应

2.2.3肠道微生物测序分析

2.2.4高尔基染色(Golgi-COX)实验

2.2.5 Morris水迷宫实验

2.2.6Y迷宫实验

2.2.7双道原子荧光法检测组织及血液铅含量

2.3数据分析

2.4实验结果

2.4.1益生菌修复铅引起的发育期大鼠肠道菌群改变

2.4.2益生菌修复铅引起的成年大鼠肠道菌群改变

2.4.3益生菌定殖修复铅引起的大鼠学习记忆能力损伤

2.4.4益生菌定殖部分修复铅引起的神经元树突棘密度降低

2.5讨论

2.6结论

第三章益生菌修复铅神经损伤的机制

3.1实验材料

3.1.1主要仪器

3.1.2主要试剂和药品

3.1.3相关抗体

3.1.4实验动物

3.2实验方法

3.2.1蛋白制样

3.2.2 BCA法检测蛋白液浓度

3.2.3蛋白免疫印迹实验

3.2.4组织免疫荧光实验

3.2.5 PC12细胞培养

3.2.6细胞脂质体转染实验

3.2.7细胞分化实验

3.2.8酶联免疫吸附试验

3.3数据分析

3.4实验结果

3.4.1益生菌定殖修复铅暴露引起的H3K27me3水平降低

3.4.2 EZH2-H3K27me3介导益生菌定殖修复铅神经损伤的作用

3.4.3白介素6介导EZH2以及学习记忆的改变

3.5讨论

3.6结论

参考文献

攻读硕士学位期间的学术活动及成果情况

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