系统性红斑狼疮血管炎相关自身抗原的血清学筛选

摘要

目的：血管炎是系统性红斑狼疮(SLE)主要的发病机制之一。但目前对于与SLE血管炎相关的自身抗体尚不清楚，不能对其进行早期诊断、及时治疗和判断预后。本研究拟利用SEREX技术筛选与SLE血管炎相关的自身抗原，进一步证实SEREX筛选自身免疫性疾病相关自身抗原(自身抗体)的可行性；通过对筛选出自身抗原的功能分析，找出有助于SLE诊断、治疗和判断预后的自身抗体。 方法：收集四川大学华西医院2004年10月至2005年1月SLE住院病人血清作为筛选血清。病例入选标准：(1)符合美国风湿病学会(ACR)1982年制定的SLE诊断标准，且免疫学检查ANA滴度≥1：320；(2)不伴有感染或者其它自身免疫性疾病。将8例SLE患者的混合血清作为筛选血清。利用人微血管内皮细胞cDNA文库(}tMVEC)，采用SEREX技术进行血清学筛选。筛选出的阳性克隆经内部剪切、酶切鉴定及核苷酸序列测定，最后采用NCB工的网上序列分析软件BLAST进行生物信息学分析。有意义的阳性克隆再分别利用正常人血清和单个SLE病人血清重复筛选一次，以排除假阳性克隆。 结果：1．第一轮共筛选出18个阳性反应克隆。经过第二轮筛选，获得11个克隆为非自身IgG克隆。2.11个阳性克隆经内部剪切、酶切鉴定及核苷酸序列测定，最后通过BLAST软件进行生物信息学分析发现，11个阳性克隆cDNA序列与3个已知的人类基因序列具有较高的同源性，核苷酸序列相似性分别为95％～99％。3.5个阳性克隆cDNA序列与人类基因序列SSA同源，4个阳性克隆eDNA序列与人类基因序列SSB同源，2个阳性克隆cDNA序列与人类基因序列YB—l同源。其中YB—l尚未被报道过与SLE血管炎相关。该基因在SLE中的具体功能有待进一步研究。4.利用正常人血清和单个SLE病人血清对YB-1克隆重复筛选一次，排除了YB-l为假阳性克隆的可能性。 结论：本研究进一步证实SEREX技术在自身免疫性疾病SLE中的适用性，拓宽了SEREX技术的应用范围。筛选出与SLE血管炎相关的新的自身抗体YB-l。SEREX技术提供了一种新的策略筛选与SLE相关的自身抗体a利用SEREX技术，我们可能筛选出敏感性或者特异性高的自身抗体、可能作为治疗靶点的自身抗体、能够判断疾病预后的自身抗体，从而有助于SLE的诊断、治疗和判断预后。

目录

声明

前言

材料与方法

结果

讨论

结论

参考文献

系统性红斑狼疮血管炎研究进展

致谢