羊膜移植对兔角膜新生血管模型基质金属蛋白酶及其抑制物表达的影响

摘要

目的:利用碱烧伤制备兔角膜新生血管模型,在新生血管形成的各时段检测角膜基质金属蛋白酶-2(MMP-2)及其组织型抑制物(TIMP-2)的表达,观察早期新鲜羊膜移植对MMP-2、TIMP-2表达的影响和抑制新生血管的效果.探讨早期新鲜羊膜移植抑制角膜新生血管可能的机理.方法:40只新西兰白兔,以1 mol/L的氢氧化钠碱烧伤双眼制备角膜新生血管模型,伤后右眼立即行羊膜移植术,右眼为羊膜移植组即A组(n=40),左眼作为烧伤对照组即B组(n=40),另有6只兔作为正常对照即C组(n=12).术后密切观察并记录角膜新生血管形成和生长状况,测量新生血管长度,计算新生血管面积.术后第1、3、7、14、28天处死动物,取下角膜,分别行HE染色、MMP-2和TIMP-2多克隆抗体免疫组化染色、逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)半定量检测MMP-2和TIMP-2的表达.结果:所有碱烧伤的角膜均有新生血管出现,正常对照组无新生血管出现.羊膜移植组新生血管的长度和面积均明显小于烧伤对照组(P<0.05),MMP-2和TIMP-2在正常角膜中微弱表达,烧伤后第1天MMP-2和TIMP-2表达即开始增强,第3天达高峰,第7天仍然较高,之后开始下降,羊膜移植组与烧伤对照组比较,各时段MMP-2表达减弱,而TIMP-2的表达增强,差异有显著性(P<0.05).结论:在角膜新生血管形成期间,MMP-2和TIMP-2表达均增强,早期新鲜羊膜移植能抑制角膜新生血管生长,其机制可能是通过调节MMP-2与TIMP-2间的平衡来完成.

目录

英文缩略语简表

1 引言

2 材料与方法

2.1 试验材料

2.2角膜新生血管模型的建立

2.3实验方法

2.4统计学方法

3 结果

3.1角膜新生血管情况

3.2病理组织学检查(HE染色)

3.3 免疫组织化学染色

3.4RT-PCR结果

4 讨论

4.1新生血管的形成机制

4.2角膜新生血管形成的时间进程

4.3MMPs-TIMPs平衡与角膜新生血管形成

4.4羊膜抑制CNV形成的效果和机制

5 结论

6 展望

参考文献

附图

附录

致谢

综述 基质金属蛋白酶及其抑制剂和眼新生血管疾病

参考文献