萆薢牛膝总皂苷防治痛风及其机制研究

摘要

第一部分总皂苷的提取及含量测定 结论：提取总皂苷方法可行，稳定，总成分含量能满足药效学试验的要求。　　第二部分萆薢总皂苷+牛膝总皂苷的组方合理性研究 结论：萆薜总皂苷能降低高尿酸血症小鼠血清尿酸水平，而牛膝总皂苷对小鼠血清尿酸水平无明显影响。 第三部分高尿酸血症模型的建立与总皂苷对动物高尿酸血症的防治作用及机制研究 目的建立动物高尿酸血症模型，研究萆薢牛膝总皂苷对动物实验性高尿酸血症的防治作用，并探讨其作用机制。　　第四部分总皂苷对动物痛风性关节炎的防治作用及其机制研究 结论：总皂苷对痛风性关节炎有明显的防治作用，灌胃给药能减轻急性痛风性关节炎的关节肿胀、疼痛症状，减少炎细胞浸润，降低局部组织炎症因子与细胞因子的水平。　　第五部分总皂苷对人外周血单个核细胞、J774细胞株炎症细胞因子合成及其基因表达的影响 结论：萆薢牛膝总皂苷可抑制TNF-α、IL-6的合成，抑制IL-1βmRNA、IL-8mRNA、TNF-αmRNA的表达。抑制炎性细胞因子合成可能是其治疗痛风性关节炎的主要作用机制。抑制中性粒细胞的趋化功能可能也发挥一定的作用。

目录

论文说明：英文缩略词表

第一部分总皂苷的提取及含量测定

第二部分萆薢总皂苷+牛膝总皂苷的组方合理性研究

第三部分高尿酸血症模型的建立与总皂苷对动物高尿酸血症的防治作用及机制研究

第四部分总皂苷对动物痛风性关节炎的防治作用及其机制研究

第五部分总皂苷对人外周血单个核细胞、J774细胞株炎症细胞因子合成及其基因表达的影响

Part 1 Extracting of total saponin and research on their quality

Part 2 Study on the rationality of TSD plus TSA

Part 3 Establish animal hyperuricemia model and studies on the effects and mechanisms of TSDA on animal experimental hyperuricemia

Part 4 Eeffects and mechanisms of TSDA on gouty arthritis of rabbit and rat

Part 5 Effects of TSDA on cytokine secrection and their gene expression of J774 cells and human peripheral blood mononuclear cells

前言

1、近年来痛风的发病率逐渐升高，已成为危害人类健康的一种严重的代谢性疾病

2、国内外研究概况、水平和发展趋势

3、四妙丸是治疗湿热下注的名方，是治疗痛风的经典方和基础方

4、萆薢总皂苷和牛膝总皂苷在加味四妙汤中起主要作用

5、参考文献

第一部分总皂苷的提取及含量测定

1、牛膝总皂苷提取工艺

2、牛膝提取物中总皂苷含量测定

2.1仪器、试剂

2.2方法与结果

3、萆薢总皂苷提取工艺

4、萆薢提取物中总皂苷含量测定

4.1仪器、试剂

4.2方法与结果

5、讨论与结论

6、参考文献

第二部分萆薢总皂苷+牛膝总皂苷的组方合理性研究

1、材料

1.1动物

1.2药品与主要试剂

1.3主要仪器

1.4数据分析方法

2、方法与结果

2.1萆薢总皂苷、牛膝总皂苷对尿酸致高尿酸血症小鼠血清尿酸水平影响

2.2萆薢总皂苷、牛膝总皂苷对酵母致高尿酸血症小鼠血清尿酸水平影响

2.3不同剂量的萆薢总皂苷对酵母致高尿酸血症小鼠血清尿酸水平影响

2.4萆薢总皂苷、牛膝总皂苷对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响

2.5二甲苯致小鼠耳肿胀模型优选萆薢总皂苷+牛膝总皂苷组方

2.6微晶型尿酸钠(MSU)致大鼠足肿胀模型优选萆薢总皂苷+牛膝总皂苷组方

3、讨论

3.1高尿酸血症模型

3.2萆薢总皂苷、牛膝总皂苷的降低血尿酸作用

3.3萆薢总皂苷、牛膝总皂苷的抗炎作用

3.4权重配方法优选萆薢总皂苷+牛膝总皂苷组方配比

4、结论

5、参考文献

第三部分高尿酸血症模型的建立与总皂苷对动物高尿酸血症的防治作用及机制研究

1、材料与方法

1.1药品与主要试剂

1.2动物

1.3主要仪器

1.4实验分组及给药

1.5观察指标与测定方法

1.6统计学处理

2、尿酸致小鼠高尿酸血症模型

2.1不同剂量尿酸对小鼠血清尿酸水平的影响

2.2注射尿酸后不同时间小鼠血清尿酸水平的变化

2.3性别对小鼠血清尿酸水平的影响

2.4年龄对小鼠血清尿酸水平的影响

2.5禁食对小鼠尿酸水平的影响

2.6降尿酸药物对小鼠高尿酸血症的影响

3、酵母致小鼠高尿酸血症模型

3.1不同剂量酵母膏对小鼠血清尿酸的影响

3.2酵母膏连续给药不同时间对小鼠血清尿酸的影响

3.3酵母膏对不同性别小鼠血清尿酸的影响

3.4年龄对小鼠血清尿酸水平的影响

3.5别嘌呤醇、苯溴马隆对小鼠高尿酸血症的影响

4、总皂苷对动物实验性高尿酸血症的防治作用及其机制研究

4.1总皂苷对正常小鼠血清尿酸水平的影响

4.2总皂苷对尿酸致高尿酸血症小鼠血清尿酸水平影响

4.3总皂苷对酵母致高尿酸血症小鼠血清尿酸水平的影响

4.4总皂苷对氧嗪酸钾盐致高尿酸血症小鼠血清尿酸水平的影响

4.5总皂苷对酵母致高尿酸血症大鼠血清尿酸含量、血清和肝脏XOD活性的影响

4.6总皂苷对酵母致高尿酸血症大鼠尿尿酸浓度及24h尿酸总排泄量的影响

5、讨论

5.1嘌呤代谢与尿酸的消除

5.2高尿酸血症动物模型

5.3总皂苷降低血尿酸的作用及作用分析

6、结论

7、参考文献

第四部分总皂苷对动物痛风性关节炎的防治作用及其机制研究

1、材料

1.1动物

1.2药物与试剂

1.3主要仪器

2、方法

2.1微晶型尿酸钠(MSU)诱导大鼠急性痛风性关节炎

2.2 MSU诱导兔急性痛风性关节炎

2.3角叉菜胶致大鼠足肿胀

2.4二甲苯致小鼠耳肿胀

2.5醋酸致小鼠扭体反应

2.6温浴致小鼠疼痛反应

2.7热板致小鼠疼痛反应

2.8大鼠棉球肉芽肿增生

2.9统计学处理

3、结果

3.1总皂苷对MSU诱导大鼠急性痛风性关节炎的防治作用及作用机制

3.2总皂苷对MSU诱导兔急性痛风性关节炎的防治作用及作用机制

3.3总皂苷对角叉菜胶致大鼠足肿胀的影响

3.4总皂苷对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响

3.5总皂苷对醋酸致小鼠扭体反应的影响

3.6总皂苷对温浴致小鼠痛反应潜伏期的影响

3.7总皂苷对热板致小鼠痛反应潜伏期的影响

3.8总皂苷对大鼠棉球肉芽肿增生的影响

4、讨论

4.1高尿酸血症与痛风发作

4.2痛风发作的自愈性

4.3急性痛风发作的机制

4.4痛风性关节炎分子生物学机制

4.5慢性痛风石性关节炎

4.6急性痛风性关节炎动物模型的建立

4.7总皂苷对痛风性关节炎的作用

4.8总皂苷对痛风性关节炎的作用机制

5、结论

6、参考文献

第五部分总皂苷对人外周血单个核细胞、J774细胞株炎症细胞因子合成及其基因表达的影响

1、材料与方法

1.1人外周血单个核细胞的分离与培养

1.2 RT-PCR检测人外周血单个核细胞IL-1βmRNA、IL-8 mRNA的表达

1.3J774单核-巨噬细胞株传代培养

1.4 ELISA技术检测J774细胞株TNF-α、IL-6的合成

1.5 RT-PCR检测J774细胞株TNF-αmRNA的表达

1.6中性粒细胞趋化功能测定

1.7统计学处理

2、结果

2.1总皂苷对人外周血单个核细胞(PBMC)IL-1βmRNA和IL-8mRNA表达的影响

2.2总皂苷对J774细胞株TNF-α合成的影响

2.3总皂苷对J774细胞株IL-6合成的影响

2.4总皂苷对J774细胞株TNF-αmRNA表达的影响

2.5总皂苷对中性粒细胞趋化功能的影响

3、讨论

3.1总皂苷对炎症性细胞因子IL-1 β、IL-8、TNFα及其mRNA表达的影响

3.2总皂苷对IL-6的作用与其抗痛风性关节炎的关系

3.3总皂苷对中性粒细胞趋化作用的抑制作用

3.4总皂苷治疗痛风性关节炎的细胞与分子机制探讨

4、结论

5、参考文献

论文创新点声明

研究结论

附录

1、个人简历

2、在学期间主持或主要参加的科研项目

3、在学期间参加编写的论著以及教科书

4、在学期间发表的论文

5、在学期间取得的主要成果

致谢

综述一高尿酸血症研究进展

摘要

前言

1、高尿酸血症与X综合症

2、嘌呤代谢与尿酸的消除

3、高尿酸血症的遗传学研究

4、高尿酸血症的病因与分类

5、原发性高尿酸血症

6、继发性高尿酸血症

综述二防治痛风的药物研究进展

摘要

前言

1、急性痛风性关节炎的治疗

2、痛风性复发的预防

3、接受器官移植患者的痛风治疗

4、高尿酸血症的防治

5、慢性痛风及耐受性痛风的处理