全反式维甲酸诱导HepG2细胞分化和降低软琼脂克隆形成能力及其机制的初步探讨

摘要

目的：研究全反式维甲酸(ATRA)体外对人肝癌细胞株(HepG2)分化、凋亡及软琼脂克隆形成能力的影响；并初步探讨ATRA调控骨桥蛋白(OPN)表达、诱导HeDG2细胞分化的分子机制。 方法：ATRA处理HepG2细胞，光镜下观察细胞形态；酶动力学法检测γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)比活性、甲胎蛋白(AFP)分泌量的变化；MTT法分析ATRA对HepG2增殖的影响；软琼脂培养法观察HepG2的克隆形成能力；Hoechst染色法检测ATRA作用前后的细胞凋亡情况；Western blot检测HepG2细胞中ERK<,2>的磷酸化水平及OPN、NF-κB蛋白表达量。 结果：ATRA显著抑制HepG2细胞在体外的增殖并诱导细胞分化和凋亡，使代表肝细胞恶变的γ-GT比活性、AFP分泌量明显下降(P<0.05)；软琼脂克隆形成实验结果表明未经ATRA处理的HepG2可在软琼脂上长成克隆，但经ATRA刺激后，其形成克隆变小且数目明显减少；westem blot结果显示，未经ATRA处理的HepG2细胞ERK<,2>的磷酸化水平及OPN的表达量均很高，经ATRA处理5d后，ERK<,2>的磷酸化及OPN的表达明显减少，并具显著的时间剂量依赖性，10μmol/L ATRA作用70d后ERK<,2>的磷酸化及OPN的表达几乎为零，但ERK<,2>、NF-κB蛋白表达无变化。 结论：ATRA是HepG2有效的分化诱导剂，可诱导细胞分化、凋亡并可降低HepG2的克隆形成能力；ATRA诱导HepG2细胞分化，降低软琼脂克隆形成能力，抑制细胞增殖及恶性转化的分子机制可能与ATRA抑制ERK/MAPK信号转导通路中ERK的磷酸化并进一步抑制OPN的表达相关，为ATRA诱导分化治疗肝癌提供了实验依据。

目录

论文说明：英文缩略词表

声明

摘要

1.引言

2.材料与方法

3结果

4讨论

5小结

参考文献

对课题的进一步设想

附录

致谢

综述 维甲类化合物对肿瘤细胞的分化诱导作用