豹皮樟总黄酮对佐剂性关节炎大鼠滑膜组织免疫病理变化的影响

摘要

目的:通过形态学、免疫学、分子生物学手段研究豹皮樟总黄酮(total flavone ofLitsea Coteana，TFLC)对佐剂性关节炎(adjuvant arthritis，AA)大鼠滑膜组织免疫病理变化的影响，探讨TFLC对AA大鼠治疗作用的有关机制。 方法:采用佛氏完全佐剂(freund's complete adjuvant，FCA)足跖皮下注射建立大鼠AA模型，通过HE染色、电镜观察膝关节滑膜组织、滑膜细胞形态学改变，分析TFLC对AA模型大鼠继发性炎症关节病理形态学的影响；通过免疫组化、Western Blot等方法研究TFLC对AA模型大鼠滑膜组织血管内皮生长凼子(vascularendothelial growth factor，VEGF)、细胞间粘附分子-1(intercellular adhesion molecule1，ICAM-1)的影响。 结果:TFLC(66.5，133，266 mg·kg-1)可明显减轻AA大鼠非致炎侧踝关节组织水肿、炎细胞浸润，血管翳减少；TFLC(133，266 mg·kg-1)可恢复A、B型滑膜细胞的分泌功能和细胞中高尔基体、线粒体、粗面内质网的形念异常，可明显降低AA大鼠滑膜组织的炎性细胞浸润和血管翳的形成：TFLC(66.5，133，266mg·kg-1)下调AA大鼠滑膜组织中VEGF、ICAM-1蛋白的表达。 结论:TFLC可恢复AA大鼠关节结构异常、改善滑膜细胞的分泌功能和主要细胞器的病理改变、降低AA大鼠滑膜组织中VEGF和ICAM-1蛋白的表达是其治疗AA的重要机制。

目录

论文说明：英文缩略词表

声明

摘要

1前言

2实验材料

2.1动物

2.2药品与试剂

2.3仪器与设备

3实验方法

3.1分组及大鼠AA模型的制备

3.2给药剂量及途径

3.3病理学检查

3.3.1石蜡包埋和HE染色

3.3.2AA大鼠继发侧膝关节滑膜组织电镜检查

3.4AA大鼠膝关节滑膜组织中ICAM-1、VEGF的表达(S-P免疫组化方法)

3.5AA大鼠膝关节滑膜组织VEGF、ICAM-1蛋白表达(蛋白免疫印迹法)

3.5.1膝关节滑膜组织的采集

3.5.2膝关节滑膜组织中VEGF、ICAM-1蛋白的表达

3.6统计学分析

4实验结果

4.1 TFLC对AA大鼠关节病理组织的影响

4.1.1HE染色

4.1.2 TFLC对滑膜细胞超微结构的影响

4.2 TFLC对AA大鼠膝关节滑膜组织中VEGF、ICAM-1的表达影响

4.2.1 TFLC对AA大鼠膝关节滑膜组织中VEGF的表达影响

4.2.2 TFLC对AA大鼠膝关节滑膜组织中ICAM-1的表达影响

4.2.3 TFLC对AA大鼠膝关节滑膜组织中VEGF、ICAM-1表达免疫组化图像分析

4.3TFLC对AA大鼠滑膜组织VEGF及ICAM-1蛋白表达的影响(蛋白免疫印迹法)

4.3.1 TFLC对AA大鼠滑膜组织VEGF蛋白表达的影响

4.3.2 TFLC对AA大鼠滑膜组织ICAM-1蛋白表达的影响

5讨论

5.1 TFLC对AA大鼠滑膜病理组织的影响

5.2 TFLC对AA大鼠滑膜组织中VEGF表达的影响

5.3 TFLC对AA大鼠滑膜组织中ICAM-1表达的影响

6小结

参考文献：

附录

致谢

综述 血管内皮细胞生长因子与类风湿关节炎