缺铁减缓NaHSO3对PSⅡ的毒害和改善蓝藻生长的研究

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第1章 文献综述铁的稳态在蓝藻进化过程中发挥着重要的作用

1.1 前言

1.2 铁是生命体的重要组成元素

1.3 铁元素对于光合生物尤为重要

1.4 维持细胞内铁的稳态是十分重要的

1.5 氧气出现对于光合生物的胁迫以及对铁的影响

1.6 本研究的目的和意义

第2章 实验材料与方法

2.1 实验研究材料

2.2 培养方法

2.3 同源重组载体的构建

2.3.1 构建pUC19-ΔtonB同源重组质粒

2.3.2 构建PpsbAⅡ -ΔtonB同源重组质粒

2.4 集胞藻6803的自然转化

2.5 突变株分子水平整合度的鉴定

2.5.1 集胞藻6803中总DNA的提取

2.5.2 DNA水平鉴定突变株的整合度

2.5.3 集胞藻6803中总RNA的提取

2.5.4 RT-PCR分析

2.6 蓝藻细胞中总铁含量的测定

2.7 生理活性的检测

2.7.1 生长曲线的测定

2.7.2 光合放氧的测定

2.7.3 叶绿素荧光检测

2.8 粗类囊体膜的分离

2.9 十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)

2.10 细胞内总ROS、H2O2、O2-、OH·含量的测定

2.10.1 细胞 内总活性氧 ROS含量 检测

2.10.2 细胞内 H2O2含量检测

2.10.3 细胞内 OH ·含量检测

2.10.4 细胞内 O2-含量检测

第3章 结果与分析

3.1 ΔtonB和ΔtonB+TonB的构建、整合度鉴定和总铁含量测定

3.1.1 ΔtonB和ΔtonB+TonB的构建和整合度鉴定

3.1.2总铁含量的测定

3.2 在NaHSO3存在时，缺铁有利于蓝藻的生长和光合作用

3.3 在NaHSO3存在时，缺铁改善了蓝藻PSII的光合活性

3.3.1 缺铁专一性影响PsbO亚基

3.4.2 缺铁提高了蓝藻PSⅡ的光合活性

3.4 在NaHSO3存在时，缺铁减少了ROS的产生

3.5 在NaHSO3存在时，缺铁减弱了芬顿反应发生

3.6 在NaHSO3存在时，缺铁有利于蓝藻的生长

第4章 讨论

第5章 结论

参考文献

攻读学位期间取得的研究成果

致谢