缺铁提高NaHSO3诱导的微藻光合产氢的功能机理研究

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第1章 文献综述:微藻光合制氢的意义

1.1前言

1.2微藻光合制氢的发现

1.3 氢酶对于氧气的敏感限制了微藻持续光合产氢

1.4 微藻光合制氢的厌氧技术

1.4.1 缺素

1.4.2 包埋聚集法耗氧产氢

1.4.3 NaHSO3诱导法

1.5 通过电子传递调控提高光合产氢的策略

1.5.1 光合电子源的保护

1.5.2 光合产氢交替电子源的调控

1.6 本论文的研究内容、目的及意义

第2章 材料与方法

2.1 材料与培养方法

2.2 转座子库质粒的提取

2.3 集胞藻6803的自然转化

2.4 亚硫酸氢钠诱导法筛选

2.5 突变株的总DNA/RNA的提取

2.5.1 突变株的总DNA的提取

2.5.2 突变株的总RNA的提取

2.6 转座子插入位点鉴定与分子水平外源基因整合鉴定

2.6.1 转座子插入位点鉴定

2.6.2 突变株DNA及RNA转录水平插入基因整合鉴定

2.7 集胞藻6803生长曲线测定

2.7.1 集胞藻6803生长曲线测定

2.7.2 集胞藻6803叶绿素浓度测定

2.8 集胞藻6803的叶绿素荧光测定

2.8.1 集胞藻6803的叶PSI荧光测定

2.8.2 集胞藻6803的Y（Ⅱ）的测定

2.9 缺铁指示蛋白A转录水平测定

2.10 细胞内总铁含量测定

2.11 细胞内总活性氧测定

2.12 产氢积累量测定

2.13 衣藻正常与缺铁的培养条件

2.14 衣藻缺铁的产氢测定

第3章 结果与分析

3.1.1 突变株的筛选

3.1.2 转座子插入位点鉴定

3.1.3 突变株整合度鉴定

3.2 M86缺失对蓝藻生长和光合系统的影响

3.2.1 M86缺失对蓝藻生长的影响

3.2.2 M86缺失对蓝藻光合系统活性影响

3.3 M86蛋白参与了蓝藻细胞Fe的吸收

3.3.1缺铁指示蛋白isiA的表达水平的影响

3.3.2 M86缺失对细胞内总铁的影响

3.3.3 M86蛋白对其他铁吸收突变株的回补情况

3.4 在NaHSO3诱导下M86缺失的影响

3.4.1 在NaHSO3诱导下M86缺失对光合电子的影响

3.4.2 M86缺失对细胞内总活性氧影响

3.5 在NaHSO3背景下缺Fe增加了光合产氢的效率

3.5.1 蓝藻野生型与突变株在NaHSO3诱导下产氢差异

3.5.2 衣藻在缺铁时受NaHSO3诱导产氢量的提升

第4章 实验讨论

第5章 结论

参考文献

致谢