阳离子脂质体微泡超声造影剂的制备及体外基因转染初步研究

摘要

目的:制备一种常规超声可实时观测的阳离子脂质体微泡超声造影剂，提供一个可实时观测的载体，从而为携基因微泡联合超声靶向治疗提供一定的技术支持。　　 方法:选用二软脂酰卵磷脂（DPPC）、1，2-二油烯氧基-3-三甲氨基丙烷（DOTAP）和二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000（DSPE-PEG2000）三种脂质，以一定比例混合，使用薄膜分散法制备脂质体微泡超声造影剂。在光镜下观察微泡形态，使用激光粒径仪检测微泡粒径分布，同时使用医用超声诊断仪对其体内外显影效果进行观察。体内显影效果与商用超声造影剂（声诺维）进行对比，观察其差异。通过DNA凝胶电泳实验检测自制脂质体微泡携带pGL3-control基因的能力，并对其体外细胞转染效果进行初步分析。　　 结果:以一定比例混合DPPC、DOTAP和DSPE-PEG2000为主要材料制备出的脂质体微泡的平均粒径为6.969μm。超声造影剂体内外显影效果良好,体内大动脉显影持续时间与声诺维相比无统计学差异（p>0.05）。DNA凝胶电泳实验显示自制阳离子脂质体微泡超声造影剂有着较好的携带pGL3-control基因的能力，且携带能力明显好于声诺维，同时也发现声诺维携带pGL3-control基因能力很弱。体外细胞实验证实自制脂质体微泡明显提高了pGL3-control在COS-7细胞内的转染效率（p<0.01）。　　 结论:自制阳离子脂质体微泡超声造影剂具有良好的显影及携带pGL3-control基因的能力，可以实现常规超声下大动脉内较长时间显影。在体外初步研究中有较好的协助基因转染的效果。自制阳离子脂质体微泡超声造影剂为进一步的携多种基因的脂质体微泡超声造影剂制备研究及超声联合微泡靶向基因治疗研究提供了一定的技术支持。

目录

1 前言

2 材料与方法

3 结果

4 讨论

5 结论

参考文献

综述脂质体微泡联合超声在基因治疗中的研究进展

攻读硕士学位期间论文

致谢

论文说明:英文缩略词表

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