银杏叶提取物联合阿司匹林对活化血小板诱导人冠状动脉内皮细胞ROS产生,LOX-1和磷酸化p38MAPK表达的影响

摘要

目的:在本研究中,我们通过体外活化血小板诱导人冠状动脉内皮细胞(human coronary artery endothelial cells,HCAECs)探讨治疗量银杏叶提取物(Ginkgo biloba Extract,EGb)和阿司匹林,特别二者联合能否通过调节LOX-1和磷酸化p38MAPK的表达来协同抑制氧化应激的产生。
　　方法:先以2×108/ml活化血小板刺激人冠状动脉内皮细胞,随后加入阿司匹林(1,2或5mmol/L),银杏叶提取物(4,40或400μg/ml)以及二者联合(1mmol/L阿司匹林和40μg/mlEGb)干预12小时。用H2DCF-DA荧光探针法检测HCAECs内超氧阴离子产生量。用Western Blot法检测LOX-1和磷酸化p38MAPK蛋白的表达量。
　　结果:人冠状动脉内皮细胞在活化血小板刺激之后,内皮细胞内超氧阴离子与对照组相比增加3倍左右(p<0.05vs.对照组)。阿司匹林和EGb对超氧阴离子的抑制作用均呈现剂量相关性(p<0.05vs.活化血小板组)。阿司匹林和EGb联合呈现协同作用(p<0.05vs.阿司匹林组或者EGb组)。通过western blot分析,人冠状动脉内皮细胞在活化血小板刺激之后,内皮细胞LOX-1和磷酸化p-p38表达明显增加(p<0.05vs.对照组),阿司匹林和EGb均呈现剂量相关性抑制LOX-1的表达(p<0.05vs.活化血小板组),但对p-p38没有发现此表现。阿司匹林和EGb二者联合协同抑制LOX-1与p-p38的表达(p<0.05vs.阿司匹林组或者EGb组)。
　　结论:EGb和阿司匹林二者均能在体外抑制活化血小板诱导人冠状动脉内皮细胞(HCAECs)内氧化应激的表达;EGb与阿司匹林协同抑制内皮细胞内ROS产生以及LOX-1和p-p38的表达,提示EGb和阿司匹林以及二者联合抑制动脉粥样硬化的形成和发展的机制可能通过抑制LOX-1和p-p38表达并最终抑制细胞内ROS的产生发挥作用。

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封面

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中英文缩略词

实验流程图

中文摘要

英文摘要

1前言

2材料与方法

2.1实验材料

2.2实验方法

3结果与分析

3.1血小板活化度

3.2 EGb抑制活化血小板诱导的氧化应激

3.3阿司匹林抑制活化血小板诱导的氧化应激

3.4阿司匹林联合EGb抑制活化血小板诱导的氧化应激

3.5 EGb抑制活化血小板诱导的LOX-1和p-p38表达

3.6阿司匹林抑制活化血小板诱导的LOX-1和p-p38表达

3.7阿司匹林联合EGb抑制活化血小板诱导LOX-1和p-p38表达

4讨论

5结论

参考文献

附录

致谢

综述