伊马替尼对去氧皮质酮诱导的高血压大鼠心肌纤维化的干预作用研究

摘要

背景与目的:心肌纤维化(Myocardial fibrosis,MF)是多种心血管系统疾病终末期的共同病理表现,抑制或逆转MF已成为临床防治心衰、心律失常及心源性猝死的研究热点和难点。业已证实,体内盐皮质激素水平的增高是促发MF的重要因素,但目前有关盐皮质激素致MF的分子信号机制尚不清楚。近年相关研究发现,盐皮质激素诱导的大鼠MF组织中伴有血小板衍生生长因子(Platelet-derived growth factors;PDGFs)表达异常增多。PDGFs是一种可以促进成纤维细胞、平滑肌细胞等多种细胞增殖分化的蛋白生长因子,PDGFs可致MF的观点也受到了广泛关注,提示成纤维细胞表面PDGFs信号通路可能是MF发生的重要分子机制之一。伊马替尼(Imatinib,IMA)是一种特异性酪氨酸激酶受体抑制剂,可有效抑制血小板衍生生长因子受体(Platelet-derivedgrowth factor recepter,PDGFR)活性。PDGFs信号通路的激活主要靠PDGFR进行调节,因此IMA可通过特异性抑制PDGFR活性,有效阻断PDGFs信号通路介导的细胞生物学效应。本研究通过观察PDGFR拮抗剂IMA对去氧皮质酮-盐联合诱导的高血压大鼠心肌纤维化的干预作用,探究PDGFs信号通路在盐皮质激素致MF过程中的作用及其可能的机制。
　　方法:60只雄性SD大鼠行右肾切除术,术后给予1％NaCl、0.2%KCl饮水4周并随机分为3组:对照组(CON组);去氧皮质酮组(DOCA组);去氧皮质酮+伊马替尼组(DOCA+IMA组)。尾套法每两周一次测定大鼠动脉收缩压(SBP),苦味酸-天狼猩红染色观察大鼠心肌间质胶原容积分数(CVF)和心肌血管周围胶原面积比(PVCA),苏木精染色观察心肌间质炎症反应程度,免疫组化法观察心肌组织单核巨噬细胞抗原(ED-1)表达,Western blot法检测心肌组织前胶原蛋白Ⅰ(ProcollagenⅠ),前胶原蛋白Ⅲ(ProcollagenⅢ),血小板衍生生长因子A、C(PDGF-A、PDGF-C)、血小板衍生生长因子受体-α(PDGFRα)、磷酸化血小板衍生生长因子受体-α(p-PDGFRα)及腱糖蛋白(Tenascin-C)、纤维连接蛋白(Fibronectin)表达。
　　结果:(1)DOCA组和DOCA+IMA组大鼠SBP显著高于对照组(P<0.01),尽管DOCA组和DOCA+IMA组大鼠SBP无明显差异(P>0.05),但第28天DOCA组出现明显纤维化,其CVF和PVCA指标显著高于DOCA+IMA组(P<0.05),DOCA+IMA组与CON组的CVF及PVCA无明显差异(P>0.05);(2)与CON组相比,DOCA组及DOCA+IMA组心肌间质可见明显炎症渗出及单核巨噬细胞浸润;(3)DOCA组及DOCA+IMA组PDGF-A、PDGF-C及PDGFRα表达均明显高于CON组(P<0.01),但DOCA+IMA组p-PDGFRα表达较DOCA组明显减少(p<0.01);(4)DOCA组ProcollagenⅠ、ProcollagenⅢ、Tenascin-C及Fibronectin表达均不同程度高于CON组和DOCA+IMA组(P<0.01或P<0.05)。
　　结论:盐皮质激素致心肌纤维化与心肌组织的炎症反应有关,PDGFs信号通路参与了这一炎症反应过程;伊马替尼具备抑制去氧皮质酮-盐诱导的高血压大鼠心肌纤维化作用,其机制可能与其抑制成纤维细胞表面PDGFRα活性、阻断成纤维细胞分裂增殖相关。

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1.引言

2.材料与方法

2.1 实验材料

2.2实验方法

3. 结果

3.1各组大鼠SBP变化情况

3.2 心肌组织炎症反应程度

3.3 单核巨噬细胞浸润情况

3.4 心肌组织CVF、 PVCA测量结果

3.5 心肌组织PDGF-A、PDGF-C、PDGFRα及p-PDGFRα表达情况

3.6 心肌组织Procollagen I、Procollagen III、Tenascin-C及Fibronectin表达情况

4.讨论

4.1 MF的发生机制及其炎症反应学说

4.2 PDGFs信号通路主要病理生理作用

4.3 细胞表面PDGFs信号通路构成

4.4 PDGFs信号通路的下游细胞内信号转导通路

4.5 PDGFs信号通路与MF相关性

4.6伊马替尼对盐皮质激素致MF过程的抑制作用

4.7 PDGFs信号通路参与盐皮质激素致心肌纤维化的可能机制

4.8 本研究的局限性

5 结 论

参考文献

附录

致谢