豹皮樟总黄酮保护实验性2型糖尿病大鼠肾损害机制的初步探讨

摘要

目的:研究豹皮樟总黄酮(Total Flavonoid of Listea Coreana,TFLC)对实验性2型糖尿病(Type2 diabetes mellitus,T2DM)大鼠肾脏损伤的保护作用是否与减少氧化应激和内质网应激有关,为TFLC用于改善临床2型糖尿病患者肾脏的功能提供实验基础。
　　方法:在用改良方法构建的2型糖尿病大鼠模型基础上,将成模的大鼠随机分为模型组(T2DM)、小剂量 TFLC组(STFLC)、大剂量 TFLC组(LTFLC)和非诺贝特组(FENO),治疗组分别以100mg/kg/d FENO、400mg/kg/d和600mg/kg/d TFLC治疗6周,其中FENO为降脂的阳性对照药物,同时设立正常对照组(NC)。治疗结束时进行葡萄糖耐量实验(GTT)、胰岛素耐量实验(ITT)和尿液白蛋白测定,留取大鼠空腹血清测定血糖、血脂各项指标,部分肾脏组织固定包埋后进行HE、PAS、PASM染色以观察其病理学变化,制备10％肾脏匀浆测定SOD、CAT、GSH、MDA等氧化应激指标及TG改变,免疫组化检测肾组织中GRP78蛋白表达及细胞内定位,western blot测定肾组织CHOP蛋白表达。
　　结果:①GTT实验:治疗组在30、60、120min各时间点的血糖水平均低于T2DM组,以LTFLC和FENO组降低最为明显(P<0.05)。ITT实验:治疗组大鼠各时间点的血糖值均低于T2DM组,以FENO组降低最为明显(P<0.05),LTFLC组各时间点的血糖降低幅度高于STFLC组,差异有显著性(P<0.05)。②LTFLC组的24h尿量和尿白蛋白均显著低于T2DM组(P<0.05)。T2DM组空腹血糖(FBG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)等均显著升高(P<0.05);LTFLC组上述指标均显著低于T2DM组(P<0.05)。③HE、PAS、PASM染色结果表明,T2DM组的肾小球体积增大,囊腔变窄,基底膜不规则增厚,系膜基质明显增多;LTFLC治疗组中的肾小球大小基本正常,囊腔变宽,基底膜及系膜基质轻度增厚。④与NC组对比,T2DM组肾脏中SOD、GSH均明显降低(P<0.05), MDA及TG均明显升高(P<0.05)。与T2DM组比较,STFLC治疗组除TG的降低有显著性差异(P<0.05)外,SOD、GSH的升高和 MDA的降低均无显著性差异(P>0.05);LTFLC和FENO组SOD和GSH水平均明显升高,MDA和TG均明显下降(P<0.05)。⑤免疫组化和免疫印迹法的结果表明T2DM组肾组织GRP78和CHOP的表达均明显升高,GRP78主要分布在肾小管,LTFLC和FENO组肾组织的GRP78和CHOP的表达均明显降低。
　　结论:TFLC可增加胰岛素敏感性,降低血糖、甘油三酯和胆固醇,改善实验性2型糖尿病大鼠肾脏的病理损伤。其保护肾组织的作用可能与增加组织内SOD、GSH,降低MDA、TG,减少内质网应激标志物GRP78和CHOP的蛋白表达有关。

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中文摘要

英文摘要

1前言

2 材料与方法

2.1 实验材料

2.2 实验方法

3 结果

3.1 大鼠的成模率及一般情况

3.2 TFLC对实验性2型糖尿病大鼠葡萄糖耐量（GTT）和胰岛素耐量（ITT）的影响

3.3 TFLC对实验性2型糖尿病大鼠尿液和血液生化指标的影响

3.4 TFLC对实验性2型糖尿病大鼠肾脏病理学形态的影响

3.5 TFLC对2型糖尿病大鼠肾脏氧化应激的影响

3.6 TFLC对2型糖尿病大鼠肾脏GRP78表达的影响

3.7 TFLC对2型糖尿病大鼠肾脏CHOP表达的影响

4讨论

5. 结论

5.1 TFLC可明显提高实验性2型糖尿病大鼠的胰岛素敏感性，降低血糖和甘油三酯，其效应与剂量相关，但降脂效果不及FENO。

5.2 大剂量TFLC可明显改善实验性2型糖尿病大鼠肾组织中发生的病理学形态变化。

5.3 TFLC可明显逆转肾组织内由于升高的甘油三酯、MDA所激发的氧化应激，且有一定的剂量效应。

5.4 大剂量TFLC治疗后可明显降低肾组织中GRP78和CHOP蛋白表达。

5.5 减少氧化应激及内质网应激可能与TFLC改善实验性2型糖尿病大鼠的肾损害有关。

参考文献

附录一

致谢

综述

参考文献