牛蒡子苷分离、纯化及其对实验性糖尿病大鼠血管内皮细胞保护机制的初步探讨

摘要

目的：牛蒡子苷是中药牛蒡子中生物活性最强的成分之一，从牛蒡子分离纯化牛蒡子苷，并初步探讨牛蒡子苷对实验性糖尿病大鼠血管内皮细胞损伤的保护机制。rn 方法：(1)采用L9(34)正交实验设计方法，确定了牛蒡子苷乙醇回流提取的最佳工艺;(2)对10种类型大孔吸附树脂进行筛选，筛选出对牛蒡子苷吸附效果最佳的树脂;采用硅胶柱层析法，对牛蒡子苷进一步分离纯化;(3)研究牛蒡子苷对高糖条件下RAECs活性、RAECs释放LDH、MDA和NO的变化以及RAECs表达内皮型一氧化氮合酶(eNOS)表达的影响。rn 结果：(1)采用正交实验设计方法，确定了牛蒡子乙醇回流提取的最佳工艺为乙醇浓度70％，回流3次，回流时间1h，加8倍溶剂量。(2)筛选出最佳树脂为AB-8型大孔吸附树脂，依次采用双蒸水、50％乙醇进行分离富集，最后，采用硅胶柱层析法进行纯化，牛蒡子苷的含量达到95.7％;(3)牛蒡子苷对内皮细胞有抑制作用，呈剂量依赖性地显著减少高糖诱导的LDH、ET和MDA释放;显著增加高糖条件下内皮细胞分泌NO、表达eNOS的能力。rn 结论：(1)本文提供了一种牛蒡子苷的分离、纯化方法，此方法简便，稳定，可应用于生产。(2)初步研究表明，牛蒡子苷对高糖诱导的血管内皮损伤有保护作用。