胎球蛋白B在人类受精过程中的作用初探

摘要

研究目的：
　　初步探讨胎球蛋白在人卵丘细胞中的定位表达及对受精结局的影响。为卵子质量评估及优质胚胎选择提供客观定量的依据
　　研究对象和方法：
　　1.收集安徽医科大学附属省立医院生殖中心2013年1月～2014年12月在本中心行IVF-ET治疗的64名不孕症患者，分为两组，实验组为受精低下者30个周期。对照组为选择同日获卵，但受精正常患者共34个周期。不孕原因均为女方输卵管阻塞并排除染色体异常、卵巢低反应等疾病。比较两组间的患者一般情况及妊娠结局。统计学方法采用SPSS17.0软件处理，组间均数比较用t检验，率的比较用χ2检验，P<0.05为差异有统计学意义
　　2.分别收集受精低下患者卵母细胞和正常受精患者卵母细胞的卵丘细胞及卵泡液，利用免疫组化对卵丘细胞中的胎球蛋白进行定位检测。利用实时定量荧光PCR和Western-Blot对颗粒细胞中胎球蛋白mRNA和胎球蛋白的表达量进行测定。采用ELISA试剂盒检测两组患者卵泡液中胎球蛋白的含量。
　　结果:
　　1.两组患者的IVF临床数据：两组患者年龄，体重指数,不孕年限，基础激素，卵巢刺激用药天数，Gn用药总量，注射HCG日内膜厚度及E2值和移植周期数间的差异无统计学意义。(P>0.05)，而研究组的2PN受精率、卵裂率、优质胚胎率、临床妊娠率均明显低于对照组，差异显著（P<0.05）。
　　2.利用荧光定量PCR扩增检测胎球蛋白mRNA在卵丘细胞中的表达，发现在受精低下患者卵母细胞的颗粒细胞中表达水平显著低于正常组（P<0.05）。选取受精低下患者颗粒细胞及正常受精患者颗粒细胞，利用western blot法和免疫组化检测细胞中胎球蛋白含量。结果显示，受精低下患者中卵母细胞的颗粒细胞中胎球蛋白表达水平明显降低。利用ELISA试剂盒检测受精低下患者及正常受精患者卵泡液中胎球蛋白含量，发现受精低下组患者卵泡液中胎球蛋白含量显著低于受精正常组。
　　结论：胎球蛋白B及胎球蛋白mRNA在卵丘细胞胞浆和胞核中表达，可在一定程度上预测受精结局，其含量与受精结局呈正相关。

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1引言

2 材料与方法

3结果

4讨论

结论

参考文献

附录

致谢

综述: 受精机制研究进展