纯钛表面不同处理对成纤维细胞生长以及对金黄色葡萄球菌黏附影响的初步研究

摘要

目的：
　　将纯钛试件进行不同的表面处理，通过将成纤维细胞和处理过试件进行共培养，检测细胞在不同处理表面的黏附、增殖情况。将金黄色葡萄球菌接种于经过处理的纯钛试件表面，观察细菌在不同试件表面的黏附形貌及数量。探讨更有利于与软组织结合的种植体基台表面处理方法，为临床工作提供实验依据。
　　方法：
　　将纯钛棒切割成方片状试件（10 mm×10 mm×1 mm），流水下逐级打磨抛光至1200＃，然后将钛片随机分成光滑组、双重酸蚀喷砂组（Al2O3颗粒喷砂＋HNO3/HF双重酸蚀组）、氢氟酸酸蚀喷砂组（Al2O3颗粒喷砂＋HF酸蚀组）、微弧氧化组，根据分组分别进行不同表面处理，扫描电子显微镜（SEM）观察4组试件的表面形貌并检测各组试件表面特性（包括元素成分、表面能和粗糙度）。将小鼠成纤维细胞L-929复苏后，采用细胞与材料共培养的方法，分别在1 h、2 h和4 h以及1 d、3 d和5 d利用MTT法检测成纤维细胞在不同试件表面的黏附和增殖情况，并在培养24 h后利用SEM观察成纤维细胞在试件表面的铺展形貌。另外，将金黄色葡萄球菌接种于不同钛片表面培养24 h后利用SEM观察细菌在试件表面的附着情况；并对黏附于试件表面的金黄色葡萄球菌进行菌落计数。
　　结果：
　　SEM下观察发现微弧氧化组试件表面出现了比较均匀的“火山口”样微孔，孔径在1-3μm之间；经过酸蚀喷砂处理的两组试件表面出现不规则的凹坑，且可见残留喷砂颗粒嵌于试件表面。MTT法检测各组试件表面细胞的黏附和增殖的结果表明微弧氧化组在各时间点都显著高于另外3组（P﹤0.05），差异具有统计学意义。扫描电镜下观察发现成纤维细胞在微弧氧化试件表面具有更好的铺展形貌。体外细菌在试件表面培养后SEM观察可见光滑组试件表面黏附的细菌最少，其他3组粗糙表面试件黏附细菌较多；试件表面黏附细菌进行菌落计数得到了类似的结论。
　　结论：
　　本研究表明成纤维细胞能够在经微弧氧化处理的试件表面更好地黏附和增殖；表现出良好生物相容性，从而可以有利于促进种植体基台与软组织的结合。同时本研究也发现细菌易黏附于经微弧氧化处理试件表面，因此如何使得种植体基台在促进成纤维细胞生长的同时减少细菌黏附，从而预防钛种植体相关感染是本课题组接下来的研究方向。

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1 前言

2 文献回顾

实验一 纯钛不同表面试件的制备及理化分析

1 材料

2 方法

3 结果

4 讨论

实验二 不同表面纯钛试件对成纤维细胞生长影响

1 材料

2 方法

3 结果

4 讨论

实验三 不同表面纯钛试件与金黄色葡萄球菌黏附的影响

1 材料

2 方法

3 结果

4 讨论

4 结论

参考文献

附录

致谢

附 综述: 牙种植体穿龈部分与软组织结合的研究进展