孕晚期内毒素暴露对不同性别子代体重和糖脂代谢的影响

摘要

背景：糖尿病作为一种流行范围广泛、患病率急剧增加的慢性非传染性疾病，所造成的全球性公共卫生问题日益严峻。健康和疾病的发育起源学说（Developmental Origins of Health and Disease, DOHaD）认为成年期慢性疾病的罹患风险与生命发育早期的健康状况密切相关。从生命发育早期探索成年期糖尿病致病因素和早期高危特征，可为护理人员积极开展糖尿病一级预防工作，以及及早甄别糖尿病的高危人群提供重要的科学依据。孕期内毒素（Lipopolysaccharide, LPS）暴露是不容忽视的宫内不良暴露因素，可引起胎儿宫内发育迟缓（Intrauterine Growth Retardation, IUGR），但对宫内发育迟缓的不同性别子代成年后糖脂代谢的影响还有待于探明。
　　目的：阐明孕晚期LPS暴露对不同性别子代小鼠体重和糖脂代谢的影响，并初步探讨内源性性激素水平在孕晚期 LPS暴露致宫内发育迟缓子代小鼠成年后糖脂代谢紊乱的性别差异形成中的作用。
　　方法：ICR孕鼠随机分为LPS处理组和对照组，LPS处理组于孕第15天（Gestational Day15, GD15）至GD17经腹腔注射给予LPS（50ug/kg/d），对照组注射等容量生理盐水（NS）。至 GD18，1/3孕鼠剖杀取材，测量胎鼠的体重和身长，计算宫内发育迟缓发生率；2/3孕鼠自然分娩。子代小鼠分为四组：雄性对照组（CON/Male）、雄性LPS组（LPS/Male）、雌性对照组（CON/Female）和雌性LPS组（LPS/Female），标准饲料喂养至出生后120天（Postnatal Day, PD120）。断乳后子代小鼠每周称体重，每两周检测空腹血糖。PD60和PD120行腹腔注射葡萄糖耐量试验（IPGTT）及胰岛素耐受试验（ITT）。子代小鼠分别于PD14、PD35、PD60和PD120（相当于幼年期、青春期、成年期和中年期）剖杀取材，取肝脏采用RT-PCR检测肝脏组织性激素受体水平。取血制备血清采用ELISA检测血清瘦素、雌二醇（Estradiol, E2）和睾酮（Testosterone, T）水平并计算T与E2的比值，采用单试剂法检测血清甘油三酯（Triglyceride, TG）和总胆固醇（Total Cholesterol, TC）水平。
　　结果：（1）孕晚期LPS暴露可致雌、雄子代宫内发育迟缓和低出生体重；（2）孕晚期 LPS暴露可致雄性子代成年后出现空腹血糖升高、胰岛素敏感性降低和葡萄糖耐量受损，而对雌性小鼠空腹血糖、胰岛素敏感性和葡萄糖耐量无影响；（3）孕晚期LPS暴露对子代血清TG和TC水平无影响；（4）孕晚期LPS暴露可致雄性子代血清瘦素水平升高，而对雌性子代血清瘦素水平无影响；（5）孕晚期 LPS暴露可致雄性子代血清T水平降低、E2水平升高和T/E2比值降低，而对雌性子代血清T水平、E2水平及T/E2比值无影响；（6）孕晚期LPS暴露可致雄性子代成年期肝脏组织雌激素受体β（Estrogen Receptorβ, ERβ）mRNA水平升高，致雌性子代成年期肝脏组织雌激素受体ERβmRNA水平降低。
　　结论：孕晚期LPS暴露可致雄性IUGR子代小鼠成年后发生糖耐量受损，而对雌性IUGR子代小鼠糖代谢无明显影响；内源性雌、雄激素比例失衡在孕晚期LPS暴露的IUGR子代小鼠成年后糖耐量受损的性别差异形成中可能发挥了一定作用。

目录

声明

英文缩略词表

1前言

2材料与方法

2.1药品与试剂

2.2实验动物

2.3动物分组与处理

2.4糖代谢相关指标检测

2.5血清生化指标检测

2.6实时逆转录-聚合酶链反应

2.7统计分析

2.8质量控制

2.9技术路线

3结果

3.1孕晚期LPS暴露对不同性别胎鼠体重的影响

3.2孕晚期LPS暴露对不同性别子代小鼠断乳前后体重增长的影响

3.3孕晚期LPS暴露对不同性别子代小鼠葡萄糖代谢的影响

3.4孕晚期LPS暴露对不同性别子代小鼠血清脂质水平的影响

3.5孕晚期LPS暴露对不同性别子代小鼠血清瘦素水平的影响

3.6孕晚期LPS暴露对不同性别子代小鼠性激素水平的影响

3.7孕晚期LPS暴露对不同性别子代小鼠肝脏性激素受体的影响

4讨论

4.1孕晚期内毒素暴露对不同性别子代体重的影响

4.2孕晚期内毒素暴露对不同性别子代糖代谢的影响

4.3孕晚期内毒素暴露对不同性别子代内源性性激素水平和性激素受体的影响

4.4内源性性激素对不同性别子代糖代谢的影响

4.5孕晚期内毒素暴露对不同性别子代脂代谢的影响

4.6 小结

5 结论

6创新之处

7局限之处

参考文献

附录

致谢

综述:内源性性激素水平与代谢综合征和2型糖尿病的关系研究进展