ATRA对AS兔动脉血管内皮依赖性舒张功能的影响及其机制的探讨

摘要

目的：探讨全反式维甲酸（all-trans-retinoic acid，ATRA）对实验性动脉粥样硬化兔动脉血管内皮舒张功能的影响及其机制。
　　方法：普通级新西兰大耳白兔随机分3组，正常组：饲喂普通饲料；模型组：饲喂高脂饲料(普通饲料+1%胆固醇+5%猪油)；ATRA组：饲喂高脂饲料，同时ATRA灌胃5 mg/(kg·d)。8周后，麻醉处死，颈动脉取血，检测血脂浓度。动脉大体油红染色观察斑块形成情况。HE染色观察动脉内皮结构变化。高分辨率血管超声检测内皮舒张功能。离体动脉环实验检测ATRA对动脉内皮舒张功能的影响。免疫组织化学实验检测MLCK在动脉血管的表达情况。Western blot检测动脉MLCK及MAPK信号通路相关蛋白的表达情况。
　　结果：高脂饮食8周后，模型组动脉粥样硬化形成，ATRA灌胃后，对动脉粥样硬化的发生有抑制作用。与正常组相比，模型组血清中三酰甘油（TG）、总胆固醇（TCH）、高密度脂蛋白-胆固醇（HDL-c）、低密度脂蛋白-胆固醇（LDL-c）浓度明显升高（P<0.05）；油红染色表明脂质斑块明显；HE染色显示血管内膜增厚，泡沫细胞增多，平滑肌细胞极性紊乱，向内膜迁移；离体动脉环实验和高分辨率血管超声实验表明内皮依赖性舒张功能显著低于正常组（P<0.05）；MLCK及MAPK信号通路相关蛋白（P38，JNK，ERK）表达水平显著升高（P<0.05）。与模型组相比，ATRA组血清中TG,HDL-c，LDL-c浓度无差异，TCH浓度显著降低（P<0.05）；油红染色可见脂质斑块；HE染色可见血管内膜稍微增厚，泡沫细胞减少，平滑肌细胞排列较整齐；内皮依赖性舒张功能明显提高（P<0.05）；MLCK及MAPK信号通路相关蛋白（P38，JNK，ERK）表达水平显著下降（P<0.05）。
　　结论：高脂饮食可使动脉粥样硬化发生，动脉内皮损伤，动脉内皮损伤使血管内皮舒张功能下降，ATRA可降低血清中总胆固醇浓度。ATRA改善动脉粥样硬化内皮依赖性舒张功能，其机制可能与MAPK信号通路抑制动脉MLCK的表达有关。

目录

声明

中英文缩略词表（Abbreviation）

1.前言

2.材料与方法

2.1 常用仪器

2.2 AS模型的建立

2.3 高分辨率超声法检测腹主动脉血管内皮功能

2.4 兔血标本的制备与处理

2.5 兔动脉标本的制备与处理

2.6 血脂的检测

2.7 离体动脉环实验

2.8 药物体外孵育的动脉环实验

2.9 石蜡切片的制备

2.10 HE染色

2.11免疫组织化学

2.12 动脉组织蛋白的提取与定量

2.13 Western blot

2.14 统计学分析

3.实验结果

3.1 超声检测ATRA对AS兔动脉舒张功能的影响

3.2 ATRA对AS兔血脂的影响

3.3 ATRA对AS兔动脉内皮结构的影响

3.4 ATRA治疗8周对AS兔动脉内皮功能的影响

3.5 ATRA体外孵育对离体动脉环舒张反应的影响

3.6 免疫组化示ATRA对AS兔动脉MLCK表达的影响

3.7 Western blot示ATRA对AS兔动脉MLCK表达的影响

3.8 Western blot示ATRA对AS兔动脉MAPK通路相关蛋白表达的影响

4.讨论

5.结论

参考文献

附录 个人简历

致谢

综述:MLCK和动脉粥样硬化内皮功能的关系