侧根原基与愈伤组织芽再生的分子基础比较分析

目录

声明

缩 略 词 说 明

1前言

1.1植物离体器官发生

1.2植物细胞全能性

1.3植物干细胞

1.3.1茎端分生组织

1.3.2茎端分生组织的维持

1.3.3根端分生组织

1.3.4根端分生组织的维持

1.4细胞分裂素

1.4.1细胞分裂素的种类

1.4.2细胞分裂素的生物合成

1.4.3 细胞分裂素的降解

1.5生长素

1.5.1生长素的生物合成

1.5.2生长素的信号转导

1.5.3生长素的泛素化降解

1.6芽的再生

1.6.1通过愈伤组织诱导芽再生

1.6.2通过侧根原基转分化诱导芽再生

1.7目的意义

2材料与方法

2.1材料

2.1.1植物材料

2.1.2菌株和质粒

2.1.3生化试剂

2.1.4主要实验仪器

2.1.5实验引物

2.2实验方法

2.2.1拟南芥种子处理方法及组织培养

2.2.2植物RNA的提取与反转录

2.2.3克隆载体的构建

2.2.4表达载体的构建

2.2.5农杆菌介导的拟南芥遗传转化

2.2.6低熔点琼脂糖包埋切片和染色观察

3结果与分析

3.1侧根原基来源的芽和愈伤组织来源的芽再生过程的形态学观察

3.1.1拟南芥高效芽再生体系的建立

3.1.2两种芽发育过程的形态学观察

3.2转录组学筛选两种再生芽的差异基因

3.2.1样本关系分析

3.2.2差异表达基因分析

3.2.3差异表达基因的KEGG分析

3.3差异表达基因的qRT-PCR验证

3.4关键基因的表达模式分析

3.4.1生长素合成酶YUC1的表达模式

3.4.2生长素响应因子ARF5的表达模式

3.4.3生长素响应信号DR5的表达模式

3.4.4细胞分裂素合成酶基因IPT5的表达模式

3.4.5细胞分裂素信号转导调控因子ARR10的表达模式

3.4.6干细胞发育相关基因WOX5和WUS的表达模式

3.5突变体分析验证

4讨论

4.1侧根原基来源的芽再生过程和愈伤组织来源的芽再生过程的异同

4.2芽再生过程的差异基因及可能存在的调控网络

4.3基于芽再生体系的应用

5结论

参考文献

致谢

攻读学位期间发表论文及成果