应用CRISPR/Cas9敲低DEF细胞HMGB1基因对鸭坦布苏病毒复制的影响

目录

声明

符号说明

1前言

1.1 鸭坦布苏病毒研究状况概述

1.1.1 鸭坦布苏病毒的概述

1.1.2DTMUV的命名

1.1.3DTMUV的分类

1.1.4 DTMUV的病原学特征

1.1.5DTMUV的传播性

1.1.6 鸭坦布苏病毒病的流行病学

1.1.7 鸭坦布苏病毒病的诊断

1.1.8鸭坦布苏病毒病的防治

1.2 HMGB1研究状况概述

1.2.1HMGB1概述

1.2.2 HMGB1作用机制

1.2.3 HMGB1的释放机制

1.2.4 HMGB1的信号通路

1.3CRISPR研究状况概述

1.3.1CRISPR的发展史

1.3.2 CRISPR 的分类

1.3.3CRISPR的作用机制

1.4研究的目的和意义

2材料与方法

2.1材料

2.1.1病毒株和细胞

2.1.2主要仪器设备

2.1.3主要溶液的配制

2.1.4主要设备

2.2方法

2.2.1DEF细胞的制备

2.2.2 PCR 反应测定

2.2.3 DuHMGB1慢病毒体外感染

2.2.4 duHMGB1慢病毒体外感染与DTMUV感染

2.2.5 cDNA合成

2.2.6 感染 DTMUV 的 DEF 细胞（敲低 duHMGB1）中 IFN-Ⅰ（IFN-α，IFN-β）和 ISGs （PKR，Mx，OAS）mRNA表达量的变化

3结果与分析

3.1 单载体电泳结果

3.2 体外慢病毒感染

3.3 敲低DEF细胞中duHMGB1后DTMUV复制情况

3.4 敲低duHMGB1后感染DTMUV的DEF细胞中IFN-Ⅰ（IFN-α和IFN-β） mRNA表达量的变化

3.5 敲低duHMGB1后感染DTMUV的DEF细胞中ISGs（PKR、Mx和OAS） mRNA表达量的变化

4 讨论

5结论

参考文献

致谢