声明
符号说明
1前言
1.1 剪接复合体
1.1.1 SF3b复合体
1.1.2 剪接因子SF3b4
1.1.3 剪接因子Bud13
1.2拟南芥的早期胚发育过程
1.2.1合子极性的建立及合子延伸
1.2.2合子的分裂：顶细胞系与基细胞系命运的建立
1.2.3根端的建立
1.2.4顶端的建立
1.2.5辐射轴模式建成
1.3根端分生组织
1.3.1根端分生组织的结构与功能
1.3.2 根端分生组织发育的分子调控网络
1.4 Importin β蛋白家族
1.4.1 Importin β蛋白家族的功能
1.5 本研究的目的及意义
2 材料与方法
2.1材料
2.1.1植物材料及生长条件
2.1.2菌株和质粒
2.1.3 PCR 引物
2.1.4酶及生化药剂
2.2方法
2.2.1突变体的鉴定
2.2.2表达载体的构建
2.2.3农杆菌介导的拟南芥遗传转化及转基因植株的鉴定
2.2.4 qRT-PCR
2.2.5 GUS染色分析
2.2.6拟南芥种子的透明观察
2.2.7 FM4-64和PI染色
2.2.8激光共聚焦扫描显微镜观察及图像处理
2.2.9双光子荧光互补实验（BiFC）
2.2.10 Pull-down实验
2.2.11酵母的遗传转化（试剂盒法）
2.2.12染色质免疫共沉淀（试剂盒法）
3结果与分析
3.1 AtBud13调控拟南芥早期胚发育过程及基因剪接
3.1.1 AtBud13的突变导致种子败育
3.1.2 AtBud13调控拟南芥的早期胚发育过程
3.1.3 AtBud13在胚发育过程中高量表达并定位于细胞核中
3.1.4 AtBud13与酵母的Bud13蛋白高度同源
3.1.5 AtBud13的突变导致大量基因的剪接出现异常
3.1.6 AtBud13的突变导致大量胚发育相关基因的剪接出现异常
3.2拟南芥JANUS调控拟南芥早期胚发育过程
3.2.1 JANUS在胚中高量表达且在进化上非常保守
3.2.2 JANUS的突变导致种子败育
3.2.3 JANUS调控拟南芥的早期胚发育过程。
3.2.4 JANUS不调控WOX2和PIN7的剪接模式
3.2.5 JANUS调控WOX2和PIN7的转录
3.2.6 JANUS和RNA聚合酶PoI Ⅱ互作
3.2.7 RNA聚合酶PoI Ⅱ在胚发育过程中高量表达
3.2.8 RNA聚合酶Pol Ⅱ调控拟南芥的早期胚发育过程。
3.2.9 RNA聚合酶PoI Ⅱ对WOX2和PIN7的转录调控依赖于JANUS
3.2.10 JANUS选择性调控下游靶基因的转录
3.3 JANUS通过调控PLT的自转录进而影响根端分生组织的发育
3.3.1 JANUS调控拟南芥根的发育
3.3.2 JANUS调控PLTs的转录
3.3.3 Pol Ⅱ介导的PLT1的转录依赖于JANUS和IMB4
3.3.4 IMB4与JANUS互作并调控JANUS的核积累
3.3.5 IMB4不在胚发育早期表达
3.3.6 IMB4调控根端分生区的发育
3.3.7 IMB4可以调控SCR和PLTs的转录
3.3.8 JANUS通过RRM2结构域与GIFs直接互作
3.3.9 GIFs和Pol Ⅱ竞争性的与JANUS互作
3.3.10 GIFs和JANUS共同作用于PLT以调控根端分生区的发育
3.3.11 JANUS通过C端与PLT1直接互作
3.3.12 PLT1调控自身的转录并依赖于JANUS
4 讨论
4.1剪接因子AtBud13调控拟南芥早期胚发育过程
4.2 JANUS调控拟南芥早期胚发育过程
4.3 JANUS通过调控PLT的自转录进而影响根端分生组织的发育
5结论
参考文献
致谢
攻读学位期间发表论文情况
山东农业大学;
