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苹果独脚金内酯信号途径阻遏蛋白同源基因dSMXL8.2的功能鉴定

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目录

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符号说明

1 前言

1.1独脚金内酯介绍

1.1.1独脚金内酯的发现

1.1.2独脚金内酯的结构与多样性

1.2独脚金内酯研究进展

1.2.1独脚金内酯的合成途径

1.2.2独脚金内酯在植物体内的分布和转运

1.2.3独脚金内酯的信号转导途径

1.3独脚金内酯在植物生长发育过程中的作用

1.3.1独脚金内酯对植物分枝的调控

1.3.2独脚金内酯对植物根系发育的调控

1.3.3独脚金内酯与植物的衰老

1.3.4独脚金内酯与种子的萌发

1.3.5独脚金内酯与植物逆境胁迫

1.3.6独脚金内酯与植物的光形态建成

1.3.7其他作用

1.4独脚金内酯与其他激素的联系

2 材料和方法

2.1材料

2.1.1植物材料

2.1.2菌株

2.1.3载体

2.1.4酶、生化实验用品及生化试剂盒

2.1.5实验仪器与设备

2.1.6 PCR引物

2.1.7培养基

2.1.8抗生素

2.1.9缓冲液

2.2实验方法

2.2.1植物基因组DNA的提取

2.2.2植物总RNA的提取

2.2.3 RNA含量以及纯度检测

2.2.4反转录cDNA

2.2.5基因克隆

2.2.6 PCR扩增产物回收

2.2.7克隆载体的构建

2.2.8大肠杆菌感受态细胞的转化

2.2.9测序

2.2.10质粒DNA的提取

2.2.11冻融法转化农杆菌

2.2.12双酶切质粒DNA

2.2.13表达载体的构建

2.2.14转基因王林苹果愈伤组织和拟南芥的获取

2.2.15蛋白实验技术

2.2.16蛋白免疫印迹实验(Western-Blot)

2.2.17相关指标测定

2.2.18生物信息学分析

3 结果与分析

3.1苹果MdSMXL8.2 基因的分子克隆

3.1.1MdSMXL8.2基因的克隆

3.2苹果MdSMXL8.2的基因结构分析

3.2.1MdSMXL8.2的基因结构分析

3.2.2苹果中MdSMXL8.2基因存在一个可变剪接体

3.3 MdSMXL8.2的蛋白质结构分析

3.4 MdSMXL8.2的保守性及进化树分析

3.4.1 MdSMXL8.2蛋白的保守性分析

3.4.2 MdSMXL8.2的进化树分析

3.5苹果MdSMXL8.2启动子顺式作用元件分析

3.6苹果MdSMXL8.2表达模式分析

3.6.1 MdSMXL8.2组织表达模式分析

3.6.2 MdSMXL8.2激素响应分析

3.6.3 MdSMXL8.2胁迫响应分析

3.7苹果MdSMXL8.2转基因苹果愈伤组织和拟南芥的获得

3.7.1 MdSMXL8.2转基因苹果王林愈伤组织的获得

3.7.2 MdSMXL8.2转基因拟南芥的获得

3.8过表达MdSMXL8.2降低苹果愈伤组织非生物胁迫抗性

3.8.1过表达MdSMXL8.2降低愈伤组织盐抗性

3.8.2过表达MdSMXL8.2愈伤组织对渗透胁迫更敏感

3.9 MdSMXL8.2异源表达拟南芥对盐胁迫敏感

3.10 MdSMXL8.2异源表达影响拟南芥分枝数目

3.10.1 MdSMXL8.2蛋白在体外能够被rac-GR24降解

3.10.2异源过表达MdSMXL8.2影响拟南芥分枝数目

4 讨论

4.1苹果MdSMXL8.2基因的可变剪切现象

4.2 MdSMXL8.2基因参与植物非生物胁迫响应

4.3 MdSMXL8.2影响植物分枝

5 结论

参考文献

7 附录

致谢

9 攻读学位期间发表论文情况

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著录项

  • 作者

    孙卫健;

  • 作者单位

    山东农业大学;

  • 授予单位 山东农业大学;
  • 学科 果树学
  • 授予学位 硕士
  • 导师姓名 郝玉金,由春香;
  • 年度 2020
  • 页码
  • 总页数
  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 R34R3;
  • 关键词

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