腐败梭菌胶体金试纸条检测方法的建立及类毒素疫苗的制备和应用

目录

声明

符 号 说 明

1 前言

1.1 腐败梭菌研究概况

1.1.1 腐败梭菌简介

1.1.2 腐败梭菌生长特性

1.1.3 腐败梭菌致病机制

1.1.4 腐败梭菌α毒素

1.2 羊快疫概述

1.2.1 羊快疫简介

1.2.2 羊快疫的诊断

1.2.3 羊快疫的预防和治疗

1.3 胶体金免疫层析试纸条

1.3.1胶体金层析技术简介

1.3.2 胶体金层析技术原理

1.3.3胶体金免疫层析试纸条的分类

1.3.4 胶体金层析技术的应用

1.4 羊快疫疫苗的研究进展

1.4.1制苗培养基及培养方法

1.4.2 制苗佐剂研究概况

1.5 本研究的目的及意义

2 材料与方法

2.1 实验材料

2.1.1 实验动物、菌株及血清

2.1.2 实验所需试剂、材料及引物

2.1.3 主要试剂的配制方法

2.1.4 主要试验仪器

2.2 方法

2.2.1腐败梭菌培养条件的摸索

2.2.2 腐败梭菌多克隆抗体的制备

2.2.3 腐败梭菌胶体金试纸条的制备

2.2.4 腐败梭菌胶体金试纸条的检测试验

2.2.5 腐败梭菌类毒素疫苗的制备

2.2.6 腐败梭菌类毒素疫苗免疫保护性试验

3 结果

3.1 腐败梭菌培养条件摸索

3.1.1 腐败梭菌培养基的选择

3.1.2 不同培养环境的选择

3.1.3 培养最适pH的摸索

3.2 腐败梭菌胶体金试纸条的制备

3.2.1 腐败梭菌菌体蛋白的获取

3.2.2高免血清中抗体效价的检测

3.2.3纯化后抗体检测

3.2.4 抗体标记最适pH的选择

3.2.5 抗体最适标记量的选择

3.2.6 胶体金探针的制备和纯化

3.2.7 结合物原液工作浓度的确定和NC膜型号的选择

3.2.8检测线（T线）及质控线（C线）条件的建立和优化

3.2.9 腐败梭菌胶体金试纸条的检测结果

3.3腐败梭菌类毒素疫苗的制备

3.3.1 腐败梭菌外毒素的鉴定

3.3.2 小鼠致死量（MLD）的测定

3.3.3 外毒素的灭活和检验

3.3.4腐败梭菌类毒素疫苗的物理性质检验

3.3.5腐败梭菌类毒素疫苗的安全检验

3.3.6疫苗免疫效果的初步检测

3.3.7绵羊接种剂量的摸索

3.3.8 小鼠中和试验检测抗体

4 讨论

4.1 腐败梭菌培养条件的摸索

4.2 腐败梭菌胶体金试纸条检测方法的建立

4.3 腐败梭菌类毒素疫苗的制备和应用

5 结论

参考文献

附录

致谢

攻读硕士学位期间论文发表情况