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摘要
缩略词(Abbreviation)
第一章绪论
1．1 GH70家族葡聚蔗糖酶的研究进展
1．1．1 GH70家族典型葡聚蔗糖酶概述
1．1．2 GH70家族酶的催化机制
1．1．3 GH70家族葡聚蔗糖酶的结构
1．1．4分支葡聚蔗糖酶
1．2酚类化合物及其应用的研究进展
1．2．1苯二酚概述
1．2．2植物多酚的生理活性
1．3酚类化合物的糖基化修饰
1．3．1糖基化反应概述
1．3．2常用于糖基化修饰的酶
1．3．3葡聚蔗糖酶糖基化修饰酚类物质研究进展
1．3．4糖基化对苯=酚合成α-熊果苷研究进展
1．4立题依据及主要内容
第二章分支葡聚蔗糖酶糖基化修饰苯二酚
2．1．4分支葡聚蔗糖酶GtfZ-CD2的表达
2．1．5分支葡聚蔗黼GtfZ-CD2的纯化
2．1．6分支葡聚蔗糖酶GtfZ-CD2的酶活力测定
2．1．7 HPLC检测GtfZ-CD2糖基化修饰苯二酚反应
2．1．10 LC-MS分析分支葡聚蔗糖酶糖基化修饰苯二酚的糖基化产物
2．1．11糖基化产物的核磁共振分析
2．1．12不同浓度苯二酚对分支葡聚蔗糖酶催化其糖基化的影响
2．1．13分支葡聚蔗糖酶GtfZ-CD2酶动力学常数的测定
2．2结果与讨论
2．2．1 HPLC分析GtfZ-CD2糖基化修饰苯二酚产物
2．2．2苯二酚糖基化产物的纯化和结构解析
2．2．3受体底物浓度对葡聚蔗糖酶糖基化效率的影响
2．2．4分支葡聚蔗糖酶GtfZ-CD2动力学常数
2．3本章小结
第三章半理性定点突变分支葡聚蔗糖酶GtfZ-CD2以提高其对苯二酚的糖基化修饰效率
3．1．2本章所用的引物
3．1．3培养基和培养条件
3．1．4试剂和仪器
3．1．7 Gtf-CD2突变体糖基化苯二酚的初步筛选
3．2实验结果与讨论
3．2．1分支葡聚蔗糖酶GtfZ-CD2同源模建
3．2．2分支葡聚蔗糖酶GtfZ-CD2分子对接分析
3．2．3半理性突变优化糖基化效率
3．3本章小结
第四章响应面分析优化分支葡聚蔗糖酶糖基化修饰对苯二酚生产α-熊果苷产量
4．1．1 α-熊果苷标准曲线的绘制
4．1．2单因素实验
4．1．3响应面优化实验
4．2实验结果与讨论
4．2．1单因素试验结果
4．2．2响应曲线优化实验设计及结果
4．2．3 α-熊果苷产量实验的显著性检验
4．2．4不同因素间交互作用分析
4．2．5产量工艺优化
4．3本章小结
第五章分支葡聚蔗糖酶糖基化修饰不同多酚类化合物的初步分析
5．1．3 GtfZ-CD2糖基化修饰多酚类化合物反应进程分析
5．2．2 HPLC及LC-MS分析分支葡聚蔗糖酶GtfZ-CD2糖基化修饰黄酮类化合物和白藜芦醇产物
5．2．3 HPLC分析分支葡聚蔗糖酶GtfZ-CD2糖基化修饰黄酮类化合物和白藜芦醇反应进程分析
5．3本章小结
全文工作总结与展望
附图表
参考文献
攻读硕士学位期间发表的学术论文
致谢
学位论文评阅及答辩情况表
山东大学;
