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慢性损伤促进Nogo-A及其受体在小鼠脑组织中表达

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前言

第一章 RT-PCR 法检测CUMS 小鼠脑组织Nogo-AmRNA 和NgR mRNA 的表达

一、材料与方法

二、结果

三、图版

第二章 免疫组织化学方法检测CUMS 小鼠脑组织中Nogo-A 及NgR 蛋白表达

一、材料与方法

二、结果

三、图版

第三章 Western Blot 检测CUMS 小鼠脑组织中Nogo-A 和NgR 蛋白表达

一、材料与方法

二、结果

三、图版

第四章 讨论

参考文献

致谢(ACKNOWLEDGEMENT)

附:本人在读期间发表科研论文、论著及获奖情况一览表

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摘要

Nogo为少突胶质细胞分泌的神经抑制蛋白,通过其位于神经元上的膜受体介导抑制损伤后轴突的再生。研究显示,Nogo及其受体的表达在不同实验条件下表现不一。该研究采用慢性复合压力模型(CUMS)小鼠,应用RT-PCR方法检测CUMS小鼠脑组织Nogo-A及NgR mRNA表达的变化;免疫组织化学方法检测Nogo-A以及NgR蛋白的表达及分布; Western Blot检测Nogo-A蛋白,NgR蛋白含量变化,以探讨Nogo及其受体在复合压力作用下损伤小鼠中枢神经系统中的作用。结果显示慢性复合压力作用下小鼠脑中Nogo-A以及NgR mRNA与对照组相比,一周时开始升高,三周达到峰值,P均<0.05,五周时开始下降但与对照组比较仍有显著性差异,P<0.05;免疫组织化学方法观察到Nogo-A和NgR蛋白在正常小鼠脑中分布广泛,在大脑皮层及海马均有较多分布;免疫组织化学方法和Western方法同时表明CUMS小鼠脑中Nogo-A蛋白一周开始升高,三周到高峰,P均<0.05,随即开始缓慢下降; NgR蛋白表达也有类似于Nogo-A蛋白的递增,到五周时,NgR蛋白表达也开始下降,但水平仍然较高。实验数据表明慢性复合压力下小鼠脑组织中Nogo-A以及NgR mRNA,Nogo-A和NgR蛋白均呈现先上升后下降的趋势; Nogo-A和NgR mRNA的表达与Nogo-A和NgR蛋白的表达变化的趋势是一致的;NgR蛋白提前于Nogo-A蛋白发生表达变化,并且NgR蛋白表达水平持续时间较Nogo-A蛋白长,但两者变化趋势大致上一致。所有结果都提示人们,在小鼠慢性损伤后,Nogo-A和NgR蛋白确实对神经再生起着重要的抑制作用。

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