声明
摘要
符号说明
第一章前言
1慢性阻塞性肺病(CoPD)
1．1 coPD概述
1．2 CoPD的诱因及诊断
1．3 coPD的病理生理学
1．4 coPD的发病机制
1．5 coPD的信号调控机制
1．6 CoPD的治疗现状
2冬虫夏草的研究现状
2．1化学成分的研究
2．2药理作用的研究
3 PK-PD在中药研究中的意义
3．1样品预处理方法
3．2样品检测方法
4本课题的研究思路
参考文献
第二章人工虫草CPD0301中核苷类物质定性及定量分析
1实验仪器与材料
1．1实验试剂与药品
1．2实验仪器
2实验方法
2．1核苷类物质提取与分离
2．2样品溶液的制备
2．3核苷类物质(Nucleosides)HPLc分析方法的建立
3实验结果
3．1方法的专属性
3．2标准曲线与线性范围
3．3方法精密度与准确度
3．4方法回收率
3．5人工虫草CPD0301中各核苷成分的含量
4讨论与小结
参考文献
第三章人工虫草CPD0301中甾醇类物质筛选
第一节人工虫草CPD0301中甾醇类物质定性分析
1实验仪器与材料
2实验方法
3实验结果
4讨论与小结
第二节人工虫草CPD0301中麦角甾醇的定量分析
1实验仪器与材料
2实验方法
3实验结果
4讨论与小结
参考文献
第四章人工虫草CPD0301中多糖类物质筛选
1实验仪器与材料
1．1实验试剂与药品
1．2实验仪器
2实验方法
2．1多糖类物质提取与分离
2．2多糖的测定
2．3蛋白质、多肽、氨基酸、还原性糖等杂质的测定
3实验结果
3．1多糖的含量测定
3．2杂质的测定
4讨论与小结
参考文献
第五章人工虫草CPD0301中有效成分的初步活性评价
1实验仪器与材料
1．1实验仪器与设备
1．2药品与试剂
1．3细胞
2实验方法
2．1核苷类物质的纯化
2．2细胞培养
2．3细胞传代、冻存、复苏
2．4 coPD炎症模型的建立
2．5 No的含量测定
3实验结果
3．1 csE溶液的定量测定
3．2 MTT法测定CSE对RAW264．7细胞活力的影响
3．3体外建模所需CSE浓度的筛选
3．4核苷类、甾醇类、多糖类及麦角甾醇对10％ CSE诱导的RAW264．7细胞分泌NO的影响
4讨论与小结
参考文献
第六章人工虫草CPD0301中核苷类物质的药理活性及其作用机制的研究
1实验仪器与材料
1．1实验仪器与设备
1．2药品与试剂
1．3细胞和动物
2实验方法
2．1细胞培养
2．2细胞传代、冻存、复苏
2．3 MTT法检测细胞存活率
2．4 coPD炎症模型的建立
2．5体内外相关炎症因子的测定
2．6 BALF中炎症细胞瑞士-吉姆萨染色
2．7 Balb／c小鼠肺组织形态学观察
2．8 RT-PCR法测定RAW264．7细胞中炎症因子mRNA水平
2．9 Western blot法测定体内外相关蛋白的表达
2．10免疫组化法测定肺组织中相关蛋白的表达
3实验结果
3．1核苷类物质对细胞活力的影响
3．2核苷类物质对RAW264．7中炎症因子分泌的影响
3．3核苷类物质对RAW264．7细胞中信号蛋白表达的影响
3．4核苷类物质对小鼠组织结构的影响
3．5核苷类物质缓解了COPD小鼠肺组织中的炎症反应
3．6核苷类物质对小鼠肺组织中相关信号蛋白表达的影响
4讨论与小结
参考文献
第七章麦角甾醇抗COPD的药理活性及其作用机制的研究
第一节麦角甾醇具有抗炎、抗氧化和抗细胞凋亡的作用
1实验仪器与材料
2实验方法
3实验结果
4讨论与小结
第二节麦角甾醇在巨噬细胞极化过程中发挥着重要作用
1实验仪器与材料
2实验方法
3实验结果
4讨论
5小结
参考文献
第八章麦角甾醇作为生物标示物探究人工虫草CPD0301在体内的PK-PD关联性
1实验仪器与材料
1．1实验试剂与药品
1．2实验仪器与设备
1．3实验动物
2实验方法
2．1液相色谱条件
2．2质谱条件
2．3内标物溶液的配制
2．4药物代谢动力学实验方案
2．5血浆样本前处理方法
2．6分析方法学验证
2．7药动学参数计算
3实验结果
3．1方法的专属性
3．2线性范围与定量下限
3．3精密度和准确度
3．4提取回收率
3．5稳定性
3．7基质效应
3．8药代动力学研究
4讨论
4．1样品前处理方法
4．2药动学研究的意义
5小结
参考文献
全文总结
致谢
攻读学位论文期间发表的文章
山东大学;
