TRB3表达水平通过Wnt/β-catenin信号通路对博莱霉素诱导小鼠肺纤维化的影响机制

目录

引言

实验材料与方法

1.1实验动物

1.2 主要手术器械

1.3 主要实验试剂和仪器

2.1 博莱霉素诱导小鼠肺纤维化模型的制备

2.2 标本收集方法

2.3 BALF 涂片、染色、细胞分类和计数

2.4肺组织HE染色、Masson染色和纤维化评分

2.5 肺组织羟脯氨酸测定

2.6 免疫组化染色法检测小鼠肺组织TRB3、EMT相关蛋白

2.7 Westernblot检测各组肺组织中TRB3、E-cadherin、Vimentin、Fibronectin、α-SMA、β-catenin蛋白的表达

2.8 RT-qPCR检测肺组织中TRB3、proCollaⅠ/ⅢmRNA 的表达

2.9 ELISA 检测各组肺组织CollaⅠ/Ⅲ 的含量

3 统计方法

实验结果

1 博莱霉素诱导小鼠肺纤维化造模结果

1.1小鼠肺组织HE染色、小鼠肺组织Masson染色

1.2纤维化评分

1.3小鼠肺组织羟脯氨酸测定

2 外源性调控TRB3的表达对小鼠肺组织纤维化的影响

2.1小鼠肺组织HE染色、小鼠肺组织Masson染色

2.2 小鼠肺泡灌洗液HE染色

2.3 小鼠肺组织羟脯氨酸测定

2.4纤维化评分

3 免疫组化检测小鼠肺组织TRB3、EMT相关蛋白（E-cadherin、Vimentin、Fibronectin、α-SMA）及β-catenin蛋白的表达情况

3.1免疫组化检测小鼠肺组织TRB3表达结果

3.2免疫组化检测小鼠肺组织E-cadherin蛋白表达结果

3.3免疫组化检测小鼠肺组织Vimentin蛋白、Fibronectin蛋白和α-SMA蛋白表达结果

3.4免疫组化检测小鼠肺组织β-catenin蛋白的表达结果

4 Western blot检测各组肺组织中TRB3、E-cadherin、Vimentin、Fibronectin、α-SMA、β-catenin蛋白的表达

4.1 Western blot检测各组肺组织中TRB3的表达

4.2 TRB3影响EMT相关蛋白Vimentin、α-SMA、E-Cadherin、Fibronectin的表达

4.3 Westernblot检测各组肺组织Wnt/β-catenin通路相关蛋白β-catenin的表达

5 RT-qPCR检测 mRNA水平各组肺组织TRB3、proCollaⅠ/Ⅲ表达变化

5.1 各组肺组织中TRB3 mRNA的表达情况

5.2 TRB3影响肺纤维化EMT

6 ELISA 检测各组小鼠肺组织中CollaⅠ、CollaⅢ的含量

讨论

1 博莱霉素诱导小鼠肺纤维化模型的制备

2 TRB3 参与小鼠肺纤维化的形成

3 TRB3对小鼠肺纤维化的影响

3.1 EMT与肺纤维化

3.2 TRB3对EMT及肺纤维化的影响

4 Wnt/β-catenin信号通路与肺纤维化

5 TRB3表达对Wnt/β-catenin信号通路的影响

结论

参考文献

综述:Wnt/β-catenin信号通路与肺纤维化关系的研究

参考文献

缩略语表

攻读学位期间的研究成果

致谢