IFN-α促进口蹄疫重组腺病毒疫苗诱导记忆性Tfh细胞产生的研究

目录

声明

符号说明

目 录

前言

材料与方法

1．实验材料

1.1 实验动物

2．主要仪器和试剂

2.1 主要仪器

2.2主要试剂

2.3 主要耗材

3.1 293A细胞的复苏

3.2 293A细胞的传代

3.3 重组腺病毒的扩增

3.4 病毒滴度的测定

3.5病毒滴度的计算方法

4．免疫小鼠

5.2 单个核细胞的提取

6．流式细胞术

7.1 RNA的提取

7.2 cDNA 的合成

8．ELISA检测法

8.1取出冻存的小鼠血清，检测血清中total IgG、IgG1、IgG2a、IgG2b含量变化。

8.2 以ELISA检测total IgG为例，按照说明书进行操作。

9．统计学处理

结果

10．FCM检测小鼠免疫后 30天、60天、90天活化 T细胞、记忆性 T细胞、记忆性Tfh细胞数量

10.1 FCM检测活化T细胞、记忆性T细胞、记忆性Tfh细胞的设门策略

10.2 FCM检测小鼠免疫后30天、60天、90天活化T细胞的数量

10.3 FCM检测小鼠免疫后30天、60天、90天记忆性T细胞的数量

10.4 FCM检测小鼠免疫后30天、60天、90天记忆性Tfh细胞的数量

11. FCM检测再免疫前后活化T细胞、记忆性T细胞、记忆性Tfh细胞数量

12．FCM检测小鼠免疫后90天Tfh细胞中趋化因子CXCR3、CCR6的表达

12.1 FCM检测Tfh细胞中趋化因子CXCR3、CCR6的设门策略

12.2 FCM检测小鼠免疫后90天Tfh细胞中趋化因子CXCR3、CCR6的表达

13. FCM检测再免疫前后Tfh细胞中细胞因子IL-21、IFN-γ、IL-4的表达

13.1 FCM检测Tfh细胞中细胞因子IL-21、IFN-γ、IL-4的设门策略

13.2 FCM检测Tfh细胞中细胞因子IL-21、IFN-γ、IL-4的表达

14. FCM 检测 CXCR5-、CXCR5+T 细胞中 Bcl-6 的表达；再免疫前后 Tfh 细胞（CXCR5+Bcl-6+）数量变化；real-time PCR检测再免疫前后Bcl-6、STAT1 mRNA的表达

14.1 FCM检测Tfh细胞（CXCR5+Bcl-6+）细胞的设门策略

14.2 FCM检测CXCR5-、CXCR5+T细胞中Bcl-6的表达

14.3 FCM检测再免疫前后Tfh细胞（CXCR5+Bcl-6+）数量变化

14.4 real-time PCR检测再免疫前后Bcl-6、STAT1 mRNA的表达

15. FCM检测小鼠免疫后30天、60天、90天记忆性B细胞、IgG1型记忆性B细胞数量；再免疫前后记忆性B细胞共刺激分子CD86的表达；ELISA检测再免疫前后IgG各亚型的分泌

15.1 FCM检测记忆性B细胞、IgG1型记忆性B细胞以及B细胞表面分子CD86的设门策略

15.2 FCM检测小鼠免疫后30天、60天、90天记忆性B细胞的数量

15.3 FCM检测小鼠免疫后30天、60天、90天IgG1型记忆性B细胞的数量

15.4 FCM检测再免疫前后记忆性B细胞共刺激分子CD86的表达

15.5 ELISA检测再免疫前后血清中IgG各亚型的分泌

讨论

结论

参考文献

文献综述Tfh细胞与记忆性CD4+T细胞在疫苗免疫应答中的研究进展

综述参考文献

致谢

攻读学位期间发表的学术论文目录

个人简介

开题、中期及学位论文答辩委员组成