p25--CDK5--p53信号通路在甲醇致SK--N--SH细胞凋亡中的作用机制研究

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中英文缩略词表

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前言

材料与方法

1. 细胞株来源

2.1主要仪器

2.2主要试剂

3．实验方法

3.1甲醇配制

3.2细胞培养

3.3 CCK-8法检测SK-N-SH细胞活力

3.4显微镜观察SK-N-SH细胞形态

3.5 Annexin V-FITC双染法检测SK-N-SH细胞凋亡

3.6流式细胞仪检测SK-N-SH细胞活性氧（ROS）

3.7 RT-PCR检测SK-N-SH细胞内Calpain、p35/25、CDK5、p53基因表达水平

3.8 Western blot检测SK-N-SH细胞内Calpain2、p35、p25、CDK5、p53蛋白表达水平

4. 统计学处理

结果

1．甲醇对SK-N-SH细胞活力具有抑制作用

2．甲醇可引起SK-N-SH细胞形态发生改变

3. 甲醇可引起SK-N-SH细胞发生凋亡

4. 甲醇可引起SK-N-SH细胞内ROS水平升高

5. 甲醇致SK-N-SH细胞凋亡信号通路p25-CDK5-p53中相关基因Calpain2、p35、CDK5、p25、p53表达情况

6. 甲醇致SK-N-SH细胞凋亡信号通路p25-CDK5-p53中相关蛋白Calpain2、p35、CDK5、p25、p53表达情况

讨论

1．甲醇对SK-N-SH细胞活力具有抑制作用

2．甲醇可引起SK-N-SH细胞形态发生改变

3. 甲醇可引起SK-N-SH细胞发生凋亡

4. 甲醇可引起SK-N-SH细胞内ROS水平升高

5. 甲醇可上调信号通路p25-CDK5-p53中Calpain2、p35、CDK5、p25、p53相关基因及蛋白从而诱导SK-N-SH细胞凋亡

结论

参考文献

文献综述:氧化应激与SK-N-SH细胞凋亡的关系

综述参考文献

致谢

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开题、中期及学位论文答辩委员组成