TβRⅡ DNA甲基化在硫酸铍致肺纤维化中的作用研究

目录

声明

英文缩略词

前言

材料与方法

1、实验材料

1.1细胞系

1.2主要试剂和材料

1.3主要设备与仪器

2、实验试剂的配制

2.1 细胞培养液的制备

2.2 冻存液的配制

2.3染毒药物（BeSO4）的配制

2.4 配制含AZC的培养基

2.5 配制含TSA的培养液

2.6 电泳液的配制

2.7电转液的配制

3、实验方法

3.1 A549细胞复苏

3.2细胞传代

3.3细胞冻存

3.4细胞计数

3.5CCK-8法检测细胞增殖活性

3.6 收集细胞

3.7 巢式降落式甲基化特异性PCR法(MSP)检测TβR Ⅱ DNA甲基化和组蛋白乙酰化的改变

3.8 qRT-PCR检测各组及各时间段细胞中mRNA的表达情况

3.9 Western Blot法检测细胞中各纤维化因子的蛋白表达量

4 统计分析方法

结果

1.3 AZC与TSA干预后COL-Ⅰ的蛋白相对表达量

2. 不同剂量BeSO4刺激A549细胞中COL-Ⅲ的mRNA和蛋白的表达情况

2.1 BeSO4处理A549细胞中COL-Ⅲ的mRNA相对表达量

2.2 BeSO4处理A549细胞中COL Ⅲ 蛋白相对表达量

2.3 AZC与TSA干预后COL Ⅲ 的蛋白相对表达量

3. BeSO4刺激A549细胞中α-SMA的mRNA和蛋白的表达情况

3.1 BeSO4刺激A549细胞中α-SMA的mRNA相对表达量

3.2 BeSO4处理A549细胞中α-SMA 蛋白相对表达量

3.3 AZC与TSA干预后α-SMA的蛋白相对表达量

4. BeSO4刺激A549细胞中TβR Ⅱ的mRNA和蛋白的表达情况

4.1 不同剂量BeSO4刺激A549细胞中TβR Ⅱ的mRNA相对表达量

4.2 BeSO4处理A549细胞中TβR Ⅱ 蛋白相对表达量

4.3 AZC与TSA干预后TβR Ⅱ 的蛋白相对表达量

4.3 BeSO4处理A549细胞中TβR Ⅱ 甲基化变化

讨论

2 在BeSO4刺激下，A549细胞中TβRⅡ的变化

结论

参考文献

综述:DNA甲基化在纤维化进展中的作用

综述参考文献

致谢

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