黄芪注射液对肺血栓栓塞SD大鼠血管内膜VEGF和bFGF表达的影响

摘要

目的：肺栓塞在人群中有较高的发病率，且病死率较高；经现阶段治疗后，复发率较高，是世界医疗系统的主要经济负担。为降低其发生率及复发率，现观察不同浓度黄芪注射液对血清及肺组织中VEGF和bFGF表达，并探讨黄芪注射液促进血栓机化的机理。　　方法：购买健康雄性清洁SD大鼠55只，8?9周龄，体重120～150g。随机分实验组(N=45)，对照组(0组,N=10）。建立肺栓塞小鼠模型后，45只SD大鼠分为两组；治疗组30只，非治疗组15只。治疗组分为三组并各组注射不同浓度的黄芪注射液（20g/kg治疗组Ⅰ；40g/kg治疗组Ⅱ；60g/kg治疗组Ⅲ）治疗6d，第7d采用HE染色和免疫组化法观察造模后肺组织变化，通过RT-PCR、ELISA方法分别测定测定黄芪治疗组(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ,N=10)、非治疗组(IV，N=15)及对照组(0，N=10)肺组织中VEGF和bFGF因子的蛋白和mRNA表达水平，和血清中VEGF和bFGF的浓度。　　结果：　　1、HE染色：PE后可见肺组织呈弥漫性病变，肺泡壁充血、水肿、明显增厚，肺泡内有大量渗出物、红细胞等成分；肺间质高度淤血、水肿，部分胞浆溶解，有大量炎细胞浸润，其中非治疗组肺组织含气空腔变形严重，有的甚至丧失空腔。HE染色治疗组(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ)和非治疗组(Ⅳ)均有明显的组织变化；而未治疗组的组织变化(Ⅳ)与治疗组(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ)有区别；与治疗组(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ)相比，非治疗组(Ⅳ)肺泡不规则、组织形变严重，有的甚至丧失空腔。可见在形态学上，治疗组与非治疗存在差异。　　2、免疫组化：结果显示：结果显示：空白组为无色组（图11）；治疗组(I)为浅棕褐色组（图12）；治疗组(Ⅱ)为棕黄色组（图13）；治疗组(Ⅲ)为棕黄色(图14)；非治疗组(Ⅳ)为淡黄色(图15)；可见在治疗组中大鼠肺组织颜色较深，VEGF、bFGF表达率高且表达强度高；于治疗组比，非治疗组中大鼠肺组织颜色较浅，VEGF、bFGF有表达，表达率及表达强度较低。进一步说明在病例基础中治疗组与非治疗组存在差异。　　3、ELISA：①与空白组相比，VEGF在治疗(Ⅲ)组和非治疗(Ⅳ)组均有统计学意义（P＜0.01）；与非治疗(Ⅳ)组相比，VEGF在治疗组无统计学意义（P＞0.05）。②与空白组(0)相比，治疗(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ)组和非治疗(IV)组中bFGG区别较明显，均有统计学意义（P＜0.01）；与非治疗(IV)相比，治疗组(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ) bFGG均有统计学意义（P＜0.01）；与治疗组(Ⅰ)相比，治疗组(Ⅱ、Ⅲ)bFGF有统计学意义(P＜0.01)；与治疗组(Ⅱ)相比，治疗组(III)bFGF无统计学意义（P＞0.05）。　　4、RT-PCR：VEGF在治疗组(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ)组和非治疗组(Ⅳ)中均有较高灰度值，而空白组(0)灰度值较低，故可知，治疗组(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ)、非治疗组(IV)和空白组(0)VEGFmRNA有区别　　结论：　　1、PE后VEGF和bFGF水平均升高，其中bFGF上升更为明显。　　2、PE经黄芪注射液治疗后，bFGF血清浓度显著升高且持续时间长，且黄芪注射浓度与bFGF浓度相关，但有封顶效应。(20g-40g间呈正相关，40g-60g间无统计学意义)。黄芪注射液可能通过升高bFGF促进PE后的转归。

目录

声明

第一章 前 言

1.1 PE与DVT的流行病

1.2 PE与VGEF和bFGF的关系

1.3黄芪与VEGF和bFGF的关系

1.4黄芪对PE其他因子的影响

第二章 材料和方法

2.1主要仪器和设备

2.2主要试剂及配制

2.3实验材料的制备

2.4 HE染色方法

2.5.免疫组化染色

2.6 ELISA测定

2.7RT-PCR的测定

2.8统计学方法

第三章 结 果

3.1HE染色结果：

3.2免疫组化染色结果：

3.3ELISA结果

3.4 RT-PCR结果：

第四章 讨 论

4.1模型制作讨论

4.2结果讨论

第五章 结 论：

参考文献

文献综述:麻醉方式与药物对静脉血栓的影响及防治方法的探讨

缩 略 语 表

攻读学位期间发表文章情况

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