舒芬太尼对小鼠坐骨神经损伤后脊髓L4-6节段和坐骨神经Bcl-2和Caspase-3表达的影响

摘要

目的：　　观察舒芬太尼对小鼠周围神经损伤后脊髓L4-6节段和坐骨神经损伤局部神经细胞凋亡的影响以及对该两处组织Bcl-2、Caspase-3表达的影响，初步探讨舒芬太尼对小鼠周围神经损伤修复的影响。　　方法：　　健康Balb/c小鼠400只，随机分为五组，空白对照组（Blank组）、环孢素组（CsA组）、舒芬太尼高（H组）、中（M组）和低剂量组（L组）。建立小鼠坐骨神经损伤模型，术后分组腹腔注射给药。于术后第1d、3d、5d、1w、2w、4w、8w、12w分别观察小鼠大体情况和手术切口愈合情况，处死小鼠取术侧吻合口上下坐骨神经共5mm和脊髓L4-L6节段，分别标记后每组制作石蜡切片进行HE染色置于光学显微镜下观察,做Western-Blot和Real-time PCR检测Bcl-2和Caspase-3蛋白质和mRNA的表达，然后对所得数据进行统计分析。　　结果：　　1.大体观察，各组小鼠坐骨神经损伤后均表现为右后肢拖拽样行走，其余肢体活动正常,术后第1w小鼠右后肢足底开始出现不同面积的溃疡，空白对照组最明显，空白对照组手术切口免疫炎性反应明显，而环孢素组和舒芬太尼组不显著。　　2.HE染色光学显微镜下观察坐骨神经标本，环孢素组和舒芬太尼组在术后第8w神经纤维排列和分布比空白对照组整齐和有规则。　　3.Western-Blot结果：各时间点各组与空白对照组相比，Bcl-2蛋白的表达均高，而Caspase-3蛋白的表达均低，尤其是在术后第2w，P<0.05，差异有统计学意义。　　4.Real-time PCR结果:各时间点各组与空白对照组相比，Bcl-2 mRNA的表达均高，而Caspase-3 mRNA的表达均低，尤其是在术后第2w。　　结论：　　1.小鼠坐骨神经损伤后，损伤局部有免疫炎性反应产生，其过度表达时不利于周围神经损伤后的修复,坐骨神经损伤局部和脊髓L4-6节段均有神经细胞凋亡的存在，两处组织均有Bcl-2和Caspase-3的表达。　　2．使用舒芬太尼干预后，坐骨神经损伤局部及脊髓L4-6节段组织Bcl-2的表达上调，Caspase-3的表达下调，舒芬太尼的剂量与二者的表达调节程度有一定的量效关系，使用舒芬太尼干预在坐骨神经损伤后第2w抑制神经细胞凋亡效果最明显。　　3．舒芬太尼对周围神经损伤有一定保护作用，并可能是通过抑制炎性反应过度表达，调节神经损伤局部及相应脊髓节段组织Bcl-2和Caspase-3的表达，抑制神经细胞凋亡，减轻神经损伤，从而间接地达到促进神经损伤修复的作用。

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中文摘要

英文摘要

前言

1材料和方法

1.1实验材料

1.2实验方法

1.3检测指标

1.4统计分析

2结果

2.1形态学评价

2.2 Western-Blot结果

2.3 Real-Time PCR结果

3讨论

4结论

参考文献

文献综述:Bcl-2和Caspase-3在神经细胞损伤后的变化

缩略语表

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