PRP在自体神经外膜小间隙桥接法中修复周围神经损伤的应用研究

摘要

目的：探索PRP联合自体神经外膜小间隙修复周围神经损伤的效果，比较PRP与神经碎片和神经生长因子三者之间促神经再生的强弱。　　方法：50只雄性獭兔随机分成5组，每组10只，任取其中一组切断坐骨神经后，采用传统断端神经外膜缝合作为对照组，从剩下4组中抽出一组，术前2h抽血5ml，两次离心后制备富血小板血浆（PRP）约0.5ml。剩下4组全部切断坐骨神经后建立自体神经外膜小间隙模型，单纯自体神经外膜桥接小间隙组为实验A组，向小间隙内注射0.4ml的神经生长因子作为神经生长因子联合自体神经外膜小间隙组（实验B组），向小间隙内加入适量剪碎的神经碎片作为自体神经碎片联合自体神经外膜小间隙组（实验C组），向小间隙内注射0.4mlPRP作为PRP联合自体神经外膜小间隙组（实验D组）。术后不定时观察动物患肢恢复自主活动的情况和足底溃疡的愈合情况，12周时显露坐骨神经手术部位，大体观察神经吻合处是否膨大、与周围组织粘连情况，是否有神经瘤形成，小间隙是否连续、塌陷、移位以及神经、血管再生情况。然后行神经电生理检测，记录动物患肢坐骨神经传导速度，组织切片、石蜡包埋后HE染色、铀铅双染色分别在光镜和电镜下对5组动物的神经再生情况进行观察。　　结果：　　1、大体观察：对照组神经吻合处膨胀，与周围结缔组织明显粘连，有神经瘤形成，浅表未见血管形成；实验组小间隙与周围组织未见明显粘连，小间隙连续、无塌陷、移位，可见近端再生神经纤维长入远端，再生神经直径与正常神经一致，无神经瘤形成，浅表可见血管形成。　　2、神经电生理检测：坐骨神经传导速度：PRP联合自体神经外膜小间隙组优于自体神经碎片联合神经外膜小间隙组优于神经生长因子联合自体神经外膜小间隙组优于单纯自体神经外膜小间隙组优于对照组。　　3、光镜和电镜下观察情况：对照组HE染色后可见吻合处有髓神经纤维稀疏，排列不规则，切面有瘢痕增生，神经纤维之间有大量结缔组织和少量血管生成，而其他四组小间隙处有髓神经纤维较多，排列较规则，神经纤维之间有大量血管生成，其中，PRP联合自体神经外膜小间隙组再生神经纤维最多，均匀分布，排列规则，髓鞘较厚，有大量毛细血管生成；在电镜下，对照组髓鞘排列不规则，不成熟，有神经瘤样组织，雪旺氏细胞增生不明显，细胞浆不清，线粒体水肿，核仁畸形，而其他四组髓鞘较成熟，无神经瘤样组织，雪旺氏细胞增生较多，胞浆清楚，线粒体肿胀不明显，神经外膜、束膜完整，血管增生较多。　　结论：　　1、自体神经外膜桥接小间隙修复周围神经损伤的效果明显优于传统断端神经外膜缝合法。　　2、小间隙内加入促神经再生的物质如PRP、神经碎片、神经生长因子，形成适宜神经再生的微环境，促进了损伤神经的修复。　　3、PRP与神经碎片、神经生长因子相比更能显著改善小间隙内的微环境，促进周围神经再生和功能恢复。　　4、PRP联合自体神经外膜小间隙修复周围神经损伤效果明显，为临床上应用PRP修复周围神经损伤提供了理论基础。

目录

声明

前言

1. 材料与方法

1.1 实验材料

1.2 动物分组及手术方法

1.3 观察指标和方法

1.4 统计学分析

2. 结果

2.1 一般大体观察

2.2 术后12周神经电生理检测

2.3 HE染色镜下观察

2.4 透射电镜下超微结构观察

3.讨论

3.1 自体神经外膜桥接小间隙的可行性及优越性

3.2 PRP修复神经损伤的作用机制

3.3 PRP对小间隙微环境的改善

3.4 本实验的局限性

4、结论

参考文献

文 献 综 述:富血小板血浆在临床骨科中的应用进展

缩 略 语 表

攻读学位期间发表文章情况

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致谢