不同地区南离方体红豆杉优质种源选取及胚培养研究

摘要

南方红豆杉（Taxus chinensis var. mairei）是红豆杉科（Taxaceae）红豆杉属（Taxus）植物，是我国分布面积最广的一种红豆杉。南方红豆杉是集用材、绿化、药用为一体的树种，但该资源因被盲目开采而处于濒危地位，故本研究对采自安徽、福建、四川三省的南方红豆杉种子进行种子千粒重、生活力、营养成分、萌发抑制物抑制性的测量分析，比较不同地区南方红豆杉种子千粒重、生活力、营养成分含量、萌发抑制物抑制性的差异，揭示其与生境因子的关系，探究不同预处理方法对南方红豆杉种子愈伤组织诱导的影响，旨在为南方红豆杉优质种源的筛选、人工栽培及其快繁研究提供理论依据。
　　本研究主要内容包括：⑴南方红豆杉种子千粒重与生活力显著正相关；种子中营养化学成分的排序为粗脂肪>水分>可溶性糖>淀粉>可溶性蛋白；不同种源南方红豆杉种子中营养化学成分的相对含量差异显著，其中，安徽省聂家山种子的千粒重、生活力及有机质含量较高、含水量较低，种子品质较高。气候因子对南方红豆杉种子营养化学成分相对含量的影响不是单一的，年降水量与种子的千粒重及生活力显著正相关，土壤特征与种子千粒重及生活力的相关性不显著，土壤全钾及有机质利于南方红豆杉种子中可溶性糖、淀粉、粗脂肪的积累。⑵同种源南方红豆杉种子不同部位均含有萌发抑制物且抑制性具有差异，即胚乳浸提液对白菜种子萌发及生长的抑制作用大于种皮浸提液的抑制作用（福建洋龙除外），且抑制性随浸提液浓度的增高而增高。四个地区南方红豆杉种子胚乳中抑制物抑制性均较强但差异不显著，种皮中抑制物抑制性则存在差异，其中，安徽仙寓山的种皮浸提液对白菜种子的生根及生长抑制性较弱，故认为安徽仙寓山的南方红豆杉种子抑制物的抑制作用较低，种子品质较高。生态因子对种子中抑制物的影响不是单一的：温度、空气湿度及土壤全氮含量与种子中抑制物抑制性呈负相关，而土壤全钾和有机质含量则与种子中抑制物抑制性呈正相关。⑶种源及胚乳（完整种子、携带一半胚乳的胚及离体胚）对愈伤组织的诱导存在影响，其中，以福建洋龙携带一半胚乳的胚作为外植体具有较高的愈伤组织诱导率。采用不同预处理方法对南方红豆杉种子愈伤组织的形成具有不同的影响。其中，0.5mg/ml2.4-D浸种5d以及1mg/ml2.4-D浸种1d的效果最好，愈伤组织诱导率可达100％；60%硫酸浸种3h+流水冲洗5d、0.2mg/ml6-BA浸种1d和0.5mg/ml6-BA浸种5d在保证愈伤率的同时促使愈伤组织提前形成，一定浓度的GA3浸种也可缩短愈伤形成所需的时间，但愈伤组织诱导率较低。此外，刺破种皮+流水冲洗和层积处理对愈伤组织的形成具有抑制作用。⑷为获得品质较好的南方红豆杉种子，可在人工培育的过程中给予适宜的温度、湿度，充分供水并提高土壤全氮含量，但土壤全钾和有机质在促进南方红豆杉种子中营养化学成分的积累的同时，也与种子中抑制物的抑制性呈显著正相关，因此在培育过程中注意调节其含量。

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第一章 综 述

1 种子休眠的研究进展

1.1种子休眠原因

1.2破除种子休眠的方法研究

2 红豆杉的研究现状

2.1 红豆杉概述

2.2 红豆杉种子休眠及破除技术研究

2.3 红豆杉愈伤组织诱导与培养技术研究

3 本研究的目的和意义

第二章 南方红豆杉不同种源种子千粒重、生活力、营养化学成分含量的比较及其与生态因子的关系

1 材料与方法

1.1 实验材料

1.2 实验试剂

1.3 实验器材

1.4 实验方法

1.5 数据处理

2 结果

2.1 不同种源南方红豆杉种子比较

2.2 生态因子对南方红豆杉种子千粒重、生活力及营养化学成分含量的影响

3 讨论

3.1 不同种源南方红豆杉种子的千粒重及生活力分析

3.2 不同种源南方红豆杉种子营养化学成分含量的差异

3.3种子营养化学成分与生态因子的关系

3.4 结论

第三章 南方红豆杉不同种源种子抑制物抑制性的比较及其与生态因子的关系

1 材料与方法

1.1 实验材料

1.2 实验试剂

1.3 实验器材

1.4 实验方法

1.5 数据处理

2 结果与分析

2.1 不同种源南方红豆杉种子甲醇浸提液的生物测定

2.2 生态因子对南方红豆杉种子萌发抑制物抑制性的影响

3 讨论

3.1 不同种源南方红豆杉种子萌发抑制物抑制性的差异

3.2 种子抑制物与生态因子的关系

3.3 结论

第四章 不同预处理对南方红豆杉种子的组织培养的影响

1 材料与方法

1. 1 植物材料

1.2 实验试剂

1.3 实验仪器

1.4 培养基的配制及灭菌

1.5 培养方法

1.6 种子预处理

1.7 数据处理

2 结果与分析

2.1 种源及胚乳对南方红豆杉种子愈伤组织诱导的影响

2.2 外种皮处理对南方红豆杉种子愈伤组织诱导的影响

2.3 激素处理对南方红豆杉种子愈伤组织诱导的影响

2.4 层积处理对南方红豆杉种子愈伤组织诱导的影响

3 讨论

3.1种源及胚乳对愈伤组织诱导的影响

3.2 不同预处理方式对南方红豆杉胚愈伤化的影响

3.3 结论

结论

参考文献

附录

致谢

附：本人读期间发表论文以及获奖情况