论文说明
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摘要
符号说明
第一章文献综述
1 PAMPs介导的免疫应答
1．1先天免疫应答和适应性免疫应答反应
1．2 TLRs及其配体
1．3 TLRs作用机制
2细菌鞭毛蛋白作为免疫佐剂的研究进展
2．1鞭毛蛋白的结构特征
2．2鞭毛蛋白-TLR5的识别和结合
2．3鞭毛蛋白作为佐剂的作用机制
2．4鞭毛蛋白作为免疫佐剂的应用
3总结及展望
第二章嵌合基因的构建、原核表达及鉴定
1材料
1．1菌株、质粒、载体与细胞系
1．2培养基和主要试剂
1．3主要仪器
2方法
2．1引物的设计与合成
2．2嵌合基因FliC-FaeG、FliCs-FaeG和FliCNV-FaeG的扩增
2．3重组质粒的构建
2．4融合蛋白的二级结构预测
2．5融合蛋白的原核表达及鉴定
2．6融合蛋白的纯化
2．7 Western blot鉴定
2．8融合蛋白内毒素的去除
2．9重组融合蛋白的体外TLR5活性检测
3结果
3．1嵌合基因的扩增结果
3．2重组质粒的构建及鉴定
3．3融合蛋白的二级结构预测与分析
3．4融合蛋白的纯化
3．5 Western blot鉴定结果
3．6融合蛋白内毒素的测定
3．7融合蛋白的体外TLR5活性检测结果
4讨论
参考文献
第三章大肠杆菌鞭毛蛋白不同结构域免疫佐剂活性研究
1材料
1．1重组蛋白和小鼠
1．2细胞培养基及主要试剂
1．3仪器设备
2方法
2．1 F4ac菌毛的提取和纯化
2．2小鼠免疫
2．3 ELISA检测免疫小鼠血清抗FaeG抗体滴度
2．4 ELISA检测小鼠脾脏淋巴细胞炎性因子的表达
2．5 qRT-PCR(荧光定量PCR)检测炎性因子的表达
3结果
3．1免疫小鼠血清特异性抗体检测
3．2 ELISA试剂盒检测免疫小鼠脾脏细胞炎性因子的表达
3．3 qRT-PCR检测炎性因子的分泌
4讨论
参考文献
第四章免疫小鼠血清对F4ac+ETEC黏附仔猪小肠上皮细胞的抑制作用
1材料
1．1菌株和细胞系
1．2培养基和主要试剂
1．3主要仪器
2方法
3．2 IPEC-J2黏附抑制试验结果
4讨论
参考文献
全文总结
文章创新点
攻读学位期间发表的学术论文目录
致谢
扬州大学;
