论文说明
声明
摘要
符号说明
第1章综述
1 CCL28的研究进展
1.1 CCL28的发现与结构
1.2 CCL28的表达
1.3 CCL28的生物学作用
1.4 CCL28与人类疾病
2研究目的及意义
第2章人源CCL28基因克隆表达及多抗制备
1.2主要试验试剂
1.3相关试剂的配制
1.4相关试验仪器
2试验方法
2.1引物设计
2.2 PCR扩增
2.3重组质粒的构建
2.4重组子的筛选鉴定
2.5重组蛋白的表达与鉴定
2.6重组蛋白的纯化和鉴定
2.7动物免疫
2.8多抗血清的检测
3结果与分析
3.1 CCL28基因片段和线性化载体的扩增
3.2重组产物的茵落PCR鉴定
3.3 SDS-PAGE分析重组蛋白GST-CCL28的表达及纯化效果
3.4 Western Blot验证蛋白纯化效果
3.5 IFA和Western Blot验证小鼠多抗血清
4讨论
第3章抗人源CCL28单克隆抗体的研制
1材料
1.1主要试验材料
1.2主要试验试剂
1.3相关试验仪器
2试验方法
2.1细胞融合
2.2阳性细胞株的筛选
2.3单抗亚类鉴定
2.4腹水的制备
2.5腹水的纯化
2.7抗体效价的测定
2.8 IP验证抗体的特异性
2.9抗体表位的鉴定
3结果与分析
3.1阳性杂交瘤细胞株的筛选
3.2单克隆抗体亚类鉴定结果
3.3 SDS-PAGE验证腹水纯化效果
3.4 IP验证单抗反应性和特异性
3.5抗体表位鉴定结果
4讨论
第4章抗CCL28单克隆抗体抗肿瘤应用初探
1材料
1.1主要试验材料
1.2主要试验试剂
1.3主要试验仪器
2试验方法
2.1成瘤细胞的准备
2.2肿瘤模型的建立
2.3抗体静脉注射
3结果与分析
3.1裸鼠成瘤模型
3.2肿瘤数据分析
4讨论
全文总结
参考文献
攻读学位期间发表的科研成果
致谢
扬州大学;