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摘要
缩略词表
第一章文献综述
1莲藕病害
1.1莲藕真菌性病害
1.2莲藕病毒病
2甘薯潜隐病毒莲藕分离物
2.1分类地位
2.2寄主范围及症状
2.3传播途径
2.4 SPLV-lotus的基因组结构
3病毒检测方法
3.1生物学检测法
3.2电子显微镜检测法
3.3血清学检测法
3.4分子生物学检测法
3.5高通量测序技术法
4植物RNA沉默和病毒编码的RNA沉默抑制子
4.1 RNA沉默的基本过程
4.2 RNA沉默通路中的关键因子
4.3病毒编码的RNA沉默抑制子
5 RNA沉默抑制子的亚细胞定位与其基因沉默抑制能力间的关系
6植物病毒的致病决定因子
6.1部分病毒编码的RNA沉默抑制子也是其致病决定因子
6.2 RNA沉默抑制子的亚细胞定位与病毒致病力间的关系
7研究目的与意义
第二章甘薯潜隐病毒莲藕分离物抗血清制备
1材料与试剂、溶液和培养基的配制
1.1材料与试剂
1.2常用试剂、溶液和培养基
1.3 Western blot试剂
1.4 ELISA试剂
2实验方法
2.1 LiCl提取植物总RNA
2.2反转录
2.3 PCR(聚合酶链式反应)
2.4 PCR产物的纯化
2.5 DNA片段与载体的连接
2.6大肠杆菌DH5α感受态的转化
2.7质粒提取
2.8原核蛋白的诱导纯化
2.9 Western blot检测
2.10 ELISA检测
2.11 Dot blot检测
3结果与分析
3.2 SPLV-lotus抗血清的效价检测
3.3 SPLV-lotus的血清学检测
3.4 SPLV-lotus与SPLV-sp血清学交叉反应检测
4总结与讨论
第三章SPLV-lotus HC-Pro生物学功能研究
1材料
1.1植物材料与菌株
1.2常用试剂、溶液和培养基
1.3农杆菌介导的瞬时表达系统相关试剂
1.4酵母双杂交实验相关试剂
2实验方法
2.1 Gateway反应体系
2.2原核蛋白的诱导纯化
2.3冻融法农杆菌转化体系
2.4农杆菌浸润法介导的瞬时表达
2.5长波紫外灯下观察与拍摄及激光共聚焦显微镜观察
2.6酵母双杂交
2.7戊二醛交联
3结果与分析
3.2 HC-ProSPLV-lotus蛋白生物学功能研究
3.3 SPLV-lotus的致病决定因子
3.4 HC-ProSPLV-lotus蛋白的亚细胞定位对其功能影响研究
3.5 HC-ProSPLV-lotus自身互作验证
3.6 WG基序对HC-ProSPLV-lotus蛋白功能影响
3.7 HC-ProSPLV-lotus与AtAGO1互作验证
4总结与讨论
第四章全文结论
参考文献
附录
攻读学位期间取得的研究成果
致谢
扬州大学;