基于FabH固定化亲和色谱的微生物杀菌活性物质研究

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摘要

缩略词表

第一章文献综述

2 FabH的生物学特性研究

2．2细菌中FabH蛋白的研究进展

2．3结构特征与晶体结构复合物

2．4底物结合与特异性差异

2．5反应过程及底物结合的催化机理

3 FabH抑制剂研究进展

3．1 FabH抑制剂种类

3．2天然产物及以天然产物为先导化合物改造的抑制剂

3．3化学合成抑制剂

3．4虚拟筛选

3．5高通量筛选

1．4 FabH抑制剂的发展前景

第二章蛋白纯化及固定化酶条件优化

1．2主要仪器

1．4常用缓冲液配制

2试验方法

2．2蛋白纯化条件的探索

2．3 holo-ACP的表达

2．4 FabH活性测试方法

2．5壳聚糖微球的制备

2．6亲和色谱柱的制备

3结果与分析

3．1蛋白纯化及FabHXoo、FabDXoo电泳

3．2壳聚糖表征

3．3不同条件对固定化酶的影响

3．4 FabH与壳聚糖交联时间对其活性的影响

4本章小结

第三章活性菌株的筛选及FabH抑制活性成分研究

1．2仪器和设备

2．2抗菌活性试验方法

2．3次生代谢产物对FabHXoo抑制活性测试

2．5活性追踪

2．7 MTT微孔板稀释法测MIC

2．8生物膜层干涉技术-分子互作(BLI)

2．9等温滴定--分子互作(ITC)

3结果与分析

3．1水稻黄单胞菌的活性菌株筛选

3．2 FabHXoo活性菌株筛选

3．4互交隔链孢霉ZHJG5各组分抑制率

3．5亲和色谱柱的构建及定点分离

3．6生物活性

3．7化合物1和2对水稻白叶枯病的防治效果

3．8生物膜干涉(BLI)

3．9等温滴定量热法(ITC)

3．10分子对接结果

4本章小结

全文总结

参考文献

硕士期间发表论文情况

附录

致谢