声明
摘要
缩略语(Abbreviations)
第一章文献综述
1氯离子通道蛋白Chloride channels(CLCs)
1．1氯离子通道蛋白的分类
1．2氯离子通道蛋白的研究进展
2植物CLC型氯离子通道蛋白的生物信息学分析
3盐胁迫下植物体内的离子运输、氯(盐)毒害或耐氯性研究进展
3．1盐胁迫下植物体内离子运输
3．2盐胁迫下植物的氯(盐)毒害作用
3．3植物耐氯(盐)性研究进展
4本研究的目的和意义
第二章大豆GmCLCs基因的克隆及生物信息学分析
1材料与方法
1．1材科的培养和处理
1．2大豆幼苗总RNA提取
1．3大豆GmCLCs基因的克隆
1．4测序载体的构建及基因的测序
1．5生物信息学分析方法
2结果与分析
2．1 GmCLCs基因克隆及测序分析
2．2 GmCLCs基因的生物信息学分析
3讨论和结论
第三章基于发根技术研究GmCLCs基因过表达与耐盐性关系摘
1材料与方法
1．1大豆材料培养
1．2引物设计与合成
1．3植物表达载体p1300-GmCLCs构建
1．4大豆发根组合植株构建、盐处理及相关生理指标测定
1．5数据分析方法
2结果与分析
2．1植物表达载体pCAMBIA1305．1-GmCLCs的验证
2．2盐胁迫下转GmCLCs大豆发根组合檀株生长表型变化
2．3盐胁迫下转GmCLCs大豆发根幼苗叶片Trypan blue染色结果
2．4盐胁迫下转GmCLCs大豆发根组合植株幼苗相对电解质渗漏率变化
2．5盐胁迫下转GmCLCs大豆发根组合植株幼苗叶绿素含量变化
3讨论和结论
第四章大豆GmCLCs基因对NaCl胁迫的转录水平响应及酵母突变体互补效应摘
1材料与方法
1．1材料的培养和处理
1．2大豆幼苗RNA提取
1．3逆转录反应
1．4荧光定量RT-PCR引物设计与合成
1．5荧光定量RT-PCR反应程序
2酵母表达载体的构建
2．1目的基因克隆的PCR反应体系和程序
2．2目的基因的扩增及酵母表达载体构建
3酵母互补实验
3．1酵母感受态的制备
3．2酵母转化与酵母突变体功能互补实验
4结果与分析
4．1盐胁迫下GmCLCs基因的表达量分析
4．2酵母表达载体pYES2-GmCLCs验证
4．3 GmCLCs对酵母突变体功能互补效应
5讨论和结论
第五章大豆GmCLC1基因与耐氯(盐)性关系的功能解析
1材料与方法
1．1材料的培养和处理
1．2 GmCLC1基因的克隆
1．3植物表达载体pCAMBIA1300-GmCLC1构建建
1．4大肠杆菌和农杆菌转化方法
1．5野生型拟南芥中过表达GmCLC1
1．6大豆发根组合植株的构建及鉴定
1．7大豆子叶发根诱导方法
2耐盐性实验
2．1拟南芥和大豆组合檀株幼苗各部位Cl-含量测定
2．2大豆发根幼苗各部位相对电解质渗漏率测定
2．3大豆子叶发根最大根长和根鲜重测定
2．5 GmCLC1酵母互补实验及酵母体内Cl-含量测定
3结果分析
3．1拟南芥GmCLC1的序列分析及拟南芥过表达植株幼苗的鉴定
3．2拟南芥生长表型变化
3．3野生型和转GmCLC1拟南芥对Cl-的动态吸收比较
3．4 NaCl胁迫下GmCLCl大豆子叶发根生长量的变化
3．6 NaCl胁迫下GmCLCl大豆发根组合植株生长、相对电解质渗漏率和Cl-含量的变化
3．7酵母突变体鉴定和GmCLCl突变体互补效应及酵母体内离子含量的变化
4讨论和结论
第六章大豆GmCLC-c2基因编码蛋白的离子通道活性及其参与耐盐性的功能解析
1材料与方法
1．1材料培养和处理
1．2 GmCLC-c2基因克隆
1．3檀物表达载体和电生理载体构建
1．4大豆发根组合檀株构建及鉴定
1．5 GmCLC-c2的拟南芥过表达与突变体回补
2耐盐性实验和电生理实验
2．1拟南芥突变体鉴定
2．2大豆发根组合植株幼苗离子含量的测定
2．3拟南芥幼苗鲜重和量大根长测定
2．4拟南芥幼苗各部位离子含量测定
2．5非洲爪簟卵母细胞的电压钳实验
3结果与分析
3．1拟南芥突变体鉴定
3．2 NaCl胁迫下转GmCLC-c2大豆发根组合植株幼苗生长表型的变化
3．3 NaCl胁迫下转GmCLC-c2大豆发根组合植株幼苗离子含量的变化
3．4 NaCl胁迫下转GmCLC-c2拟南芥植株幼苗生长表型变化
3．5 NaCl胁迫下转GmCLC-c2拟南芥幼苗根鲜重和最大根长的变化
3．6 NaCl胁迫下转GmCLC-c2拟南芥幼苗根和地上部离子含量变化
3．7 GmCLC-c2氯离子通道活性分析
4讨论和结论
全文结论
创新与不足
参考文献
攻读学位期间已发表的论文目录
致谢
南京农业大学;
