声明
摘要
缩略语
引言
第一章同型半胱氨酸与卵泡囊肿研究进展
1卵泡囊肿的特征及研究进展
1．1卵泡囊肿与激素紊乱
1．2卵泡囊肿与卵泡发育异常
1．3卵泡囊肿与炎症反应
1．4卵泡囊肿与肥胖
1．5卵泡囊肿与应激
1．6卵泡囊肿与卵母细胞质量
2．1同型半胱氨酸代谢
2．2同型半胱氨酸与代谢综合征
2．3同型半胱氨酸与卵泡囊肿
第二章卵母细胞质量与线粒体功能研究进展
1．2线粒体结构概述
2卵母细胞中线粒体的功能及特殊性
2．1卵母细胞和早期胚胎中线粒体分布特点
2．2卵母细胞和早期胚胎中线粒体数量及结构特点
2．3卵母细胞和早期胚胎中线粒体氧化损伤特点
2．4卵母细胞成熟及早期胚胎发育中线粒体能量代谢特点
第三章线粒体功能与甲基化研究进展
1．1线粒体DNA研究进展
1．2 DNA甲基化及生物学功能
1．3线粒体功能与线粒体DNA甲基化
2．1 RNA甲基化及m6A概述
2．2 m6A分布和调控通路
2．3 m6A分子生物学功能
第四章同型半胱氨酸与猪卵泡囊肿卵巢中卵母细胞质量之间的关系
1材料与方法
1．1主要试剂和仪器
1．2卵巢和卵母细胞的采集
1．3卵母细胞的体外成熟
1．4卵母细胞孤雌激活
1．5发育能力检测
1．6卵泡液中Hcy浓度检测
1．7线粒体DNA拷贝数检测
1．8总RNA提取和反转录
1．9线粒体分布分析
1．10线粒体活性分析
1．11线粒体电镜观察
1．12免疫荧光
1．13蛋白质免疫印迹
1．14亚硫酸盐甲基化测序
1．15数据分析及统计
2结果与分析
2．1卵母细胞质量和发育能力
2．2卵母细胞中线粒体分布
2．3线粒体膜电位以及超微结构
2．4线粒体DNA拷贝数以及线粒体编码基因表达水平
2．5 DNMT1以及一碳代谢相关酶表达水平
2．6线粒体编码基因甲基化水平
3讨论
第五章同型半胱氨酸影响猪卵母细胞中一碳代谢及线粒体功能
1材料与方法
1．1主要试剂和仪器
1．2卵巢和卵母细胞的采集
1．3卵母细胞的体外成熟
1．4卵母细胞孤雌激活
1．5发育能力检测
1．6线粒体DNA拷贝数检测
2．1 Hcy处理对卵母细胞质量和发育能力的影响
2．2 Hcy处理对线粒体ROS的影响
2．3 Hcy处理对线粒体DNA拷贝数以及线粒体编码基因表达水平的影响
2．4 Hcy对一碳代谢相关酶及DNMT1表达水平的影响
3讨论
第六章DNA甲基化转移酶抑制剂5’AZA缓解猪卵母细胞中一碳代谢激活及线粒体功能障碍
1材料与方法
1．1主要试剂和仪器
1．2卵巢和卵母细胞的采集
1．3卵母细胞的体外成熟
1．4卵母细胞孤雌激活
1．5发育能力检测
1．6线粒体DNA拷贝数检测
1．7总RNA提取和反转录
1．8线粒体及ROS染色
1．9蛋白质免疫印迹
1．10亚硫酸盐甲基化测序
1．11数据分析及统计
2结果与分析
2．1添加5’AZA对一碳代谢相关酶及DNMT1表达水平的影响
2．2添加5'AZA对线粒体编码基因甲基化水平的影响
2．3添加5’AZA对线粒体ROS的影响
2．4添加5’AZA对线粒体DNA拷贝数和线粒体编码基因表达水平的影响
2．5添加5’AZA对卵母细胞质量和发育能力的影响
3讨论
第七章同型半胱氨酸影响猪卵母细胞中RNA甲基化m6A修饰
1材料与方法
1．1主要试剂和仪器
1．2卵巢和卵母细胞的采集
1．3卵母细胞的体外成熟
1．4蛋白质免疫印迹
1．5卵母细胞内总m6A检测(狭缝印记)
1．6免疫荧光
1．7线粒体转录本m6A分析
1．8数据分析及统计
2结果与分析
2．1 Hcy处理对卵母细胞总RNA中m6A修饰水平的影响
2．2 Hcy处理卵母细胞对m6A甲基化相关蛋白表达水平的影响
2．3 Hcy处理对卵母细胞线粒体内m6A修饰水平的的影响
2．4线粒体转录本上m6A分布
3讨论
总体讨论
全文结论
本文创新点
参考文献
致谢
攻读博士期间发表论文情况
南京农业大学;
