抗除草剂Bar基因导入小麦栽培品种的研究

摘要

小麦是重要的粮食作物之一,利用基因工程进行遗传改良的研究一直倍受人们关注.该研究以安徽本地小麦栽培品种为材料,通过建立起良好的再生休系,利用基因枪,将含有抗除草剂Bar基因的植物表达载体,导入安徽优良品种小麦幼胚愈伤组织,并通过GUS瞬时表达情况对基因枪轰击参数进行了优化.用除草剂对轰击后的材料进行分化生根筛选,共获得33株抗性再生苗.通过PCR检测和涂叶检测,初步证明其中有4株已将Bar基因整合到小麦基因组中并且得到表达,平均转化率为0.33％.此外通过回交将抗Basta(主要成分为PPT)除草剂的Bar基因转育到这些小麦品种,通过对转Bar基因小麦人工杂交与回交后代除草剂抗性的连续跟踪鉴定,研究了Bar基因在小麦杂种后代的遗传表现.

目录

文摘

英文文摘

独创性声明和关于论文使用授权的说明

第一章引言

1.1抗除草剂基因工程研究进展

1.1.1 Bar基因和转Bar基因作物的研究现状

1.1.2选育推广抗除草剂作物品种时应重视的问题

1.2小麦基因工程的研究进展

1.2.1小麦基因工程育种的研究进展

1.2.2小麦遗传转化方法的研究进展

1.2.3小麦的遗传转化存在的主要问题

1.3研究的目的和意义

1.4技术路线

第二章小麦再生体系的建立

2.1材料与方法

2.1.1材料

2.1.2方法

2.2结果与分析

2.2.1外源激素对小麦愈伤组织生长的影响

2.2.2分化前的物理处理对愈伤组织分化的影响

2.2.3不同基因型小麦愈伤组织诱导与分化

2.3讨论

第三章基因枪转化法

3.1材料与方法

3.1.1材料

3.1.2实验方法

3.2结果与分析

3.2.1质粒的提取，纯化和定量

3.2.2不同浓度PPT对小麦离体培养的影响

3.2.3叶片对除草剂PPT的抗性检测

3.2.4不同轰击参数对GUS表达的影响

3.2.5抗性植株的的筛选

3.2.6转化株的检测

3.2.7基因枪转化的结果

3.2.8小麦转基因植株的育性表现

3.3讨论

3.3.1基因枪转化体系的优化

3.3.2 PPT抗性植株的获得

3.3.3基因型对转化的影响

3.3.4转基因植株的鉴定

3.3.5转基因小麦的表型变异

第四章杂交育种方法

4.1材料与方法

4.2结果与分析

4.2.1小麦生长苗期对PPT的抗性检测

4.2.2 Bar基因在F1代中分离的遗传表现

4.2.3 Bar基因在自交分离世代中的遗传表现

4.2.4 Bar基因在回交分离世代的遗传表现

4.2.5杂交F1代农艺性状的表现

4.3讨论

第五章结论

参考文献

附录

致谢

作者简介