声明
第一章 绪论
1.1 黄曲霉毒素B1概述
1.1.1 黄曲霉毒素的理化性质
1.1.2 黄曲霉毒素的危害性
1.1.3 黄曲霉毒素的限量标准
1.2 中药材中黄曲霉毒素B1污染情况
1.2.1 国外污染情况
1.2.2 国内污染情况
1.3 黄曲霉毒素的检测方法
1.3.1 检测方法
1.3.2 免疫学检测技术
1.4 黄曲霉毒素B1抗原的设计
1.4.1 肟化法
1.4.2 半缩醛法
1.4.3 添加乙醇酸连接臂法
1.4.4 曼尼希法
1.5 本课题的研究目的及研究内容
第二章 黄曲霉毒素B1单克隆抗体的制备
2.1 引言
2.2 仪器、材料与试剂
2.2.1 仪器与材料
2.2.2 实验试剂
2.2.3 实验动物
2.2.4 溶液的配制
2.3 实验方法
2.3.1 AFB1完全抗原的制备
2.3.2 抗原的乳化及免疫
2.3.3 小鼠多抗血清效价的测定
2.3.4 细胞融合
2.3.5 杂交瘤细胞的筛选
2.3.6 阳性杂交瘤细胞的克隆
2.3.7 单克隆抗体的制备
2.3.8 单克隆抗体性质的鉴定
2.4 实验结果
2.4.1 AFB1完全抗原的鉴定
2.4.2 小鼠多抗血清效价的测定
2.4.3 杂交瘤细胞的筛选
2.4.4 阳性杂交瘤细胞的筛选及腹水纯化
2.4.5 单克隆抗体性质鉴定
2.5 讨论
第三章 ELISA方法的建立及其在中药材酸枣仁黄曲霉毒素B1污染检测中的应用
3.1 引言
3.2 仪器、材料与试剂
3.2.1 仪器与材料
3.2.2 实验试剂
3.2.3 溶液的配制
3.3 实验方法
3.3.1 最佳抗原及抗体稀释度的确定
3.3.2 抗原包被方式的选择
3.3.3 封闭液的选择
3.3.4 封闭时间的选择
3.3.5 酶标二抗最佳使用浓度的确定
3.3.6 酶标二抗最佳孵育时间的确定
3.3.7 最佳ic-ELISA方法流程的确定
3.3.8 样品测定
3.4 实验结果
3.4.1 最佳抗原及抗体稀释度的确定
3.4.2 抗原包被方式的选择
3.4.3 封闭液的选择
3.4.4 封闭时间的选择
3.4.5 酶标二抗最佳使用浓度的确定
3.4.6 酶标二抗最佳孵育时间的确定
3.4.7 最佳ic-ELISA方法流程的确定
3.4.8 样品测定
3.5 讨论
第四章 胶体金免疫层析法的建立及其在中药材酸枣仁黄曲霉毒素
4.1 引言
4.2 仪器、材料与试剂
4.2.1 仪器与试剂
4.2.2 实验试剂
4.2.3 溶液的配制
4.3 实验方法
4.3.1 AFB1完全抗原的制备
4.3.2 胶体纳米金的制备
4.3.3 金标抗体的制备
4.3.4 试纸条的组装
4.3.5 最佳抗原量的确定
4.3.6 抗原及二抗稀释液的确定
4.3.7 试纸条的测试
4.3.8 实际样品的测定
4.4 实验结果
4.4.1 AFB1完全抗原的鉴定
4.4.2 金标抗体的制备
4.4.3 最佳抗原量的确定
4.4.4 抗原及二抗稀释液的确定
4.4.5 试纸条的可视检测限及灵敏度的测试
4.4.6 试纸条的特异性检测
4.4.7 实际样品的测定
4.5 讨论
第五章 全文总结与展望
5.1 主要结论
5.2 创新点
5.3 工作展望
参考文献
致谢
攻读硕士学位期间发表的论文及其他科研成果
江苏大学;
