声明
主要缩略词表
第一章 文献综述
1.1 G蛋白偶联受体
1.1.1 G蛋白偶联受体及其生理功能
1.1.2 G蛋白偶联受体的研究意义
1.2 G蛋白偶联受体信号通路的灭活
1.2.1 G蛋白偶联受体的灭活过程及生理意义
1.2.2 G蛋白偶联受体的短时灭活机制
1.2.3 G蛋白偶联受体的长时灭活（内吞）机制
1.3 本研究拟解决的问题
第二章 实验材料与方法
2.1 果蝇品系和饲养
2.1.1 果蝇品系
2.1.2 果蝇饲养
2.2 RNA的提取及体外反转录
2.2.1 果蝇头部RNA的提取
2.2.2 RNA的体外反转录
2.3 果蝇基因组DNA的提取
2.4 质粒的制备
2.4.1 蛋白质表达的质粒
2.4.2 点突变的质粒
2.4.3 转基因果蝇的质粒
2.5 转基因果蝇的制备
2.5.1 质粒构建
2.5.2 果蝇胚胎显微注射
2.6 融合蛋白的表达及纯化
2.6.1 GST融合蛋白的表达
2.6.2 GST融合蛋白的纯化
2.6.3 MBP融合蛋白的表达
2.6.4 MBP融合蛋白的纯化
2.7 检测蛋白质与蛋白质间的相互作用
2.7.1 Pull-down
2.7.2 质谱分析
2.7.3免疫共沉淀
2.7.4 Western blotting免疫印迹
2.8 Arrestin结合与释放实验
2.9 果蝇头部切片免疫染色
2.9.1 实验材料
2.9.2 样品处理和制备
2.9.3 样品染色
2.10普通电镜染色
2.10.1 实验材料
2.10.2 样品处理和制备
2.10.3 样品染色
2.11 PIP膜结合实验
2.11.1 实验材料
2.11.2 结合实验
2.12实验数据分析与统计方法
第三章 实验结果与讨论
3.1 Arrestin1介导Rhodopsin的内吞过程
3.1.1 arrestin1突变体果蝇中Rhodopsin内吞减少
3.1.2 Arrestin1无法与AP2直接结合
3.2 dMPPE通过促进Arrestin1与AP2的结合介导Rhodopsin内吞
3.2.1 dMPPE介导Rhodopsin的内吞
3.2.2 Rhodopsin寡糖链修剪缺陷不影响其内吞
3.2.3 dMPPE介导Rhodopsin内吞的作用不依赖于其磷酸酯酶活性
3.2.4 dMPPE蛋白与Arrestin1及AP2结合
3.2.5 dMPPE通过C端与Arrestin1结合
3.2.6 dMPPE通过344-352段氨基酸序列与Arrestin1结合
3.2.7 dMPPE/Arrestin1结合介导Rhodopsin内吞
3.2.8 dMPPE不影响Arrestin1和AP2的表达水平
3.2.9 dMPPE不影响Arrestin1与Rhodopsin的结合
3.2.10 dMPPE促进 Arrestin1与 AP2α的结合
3.3 其他潜在的介导Arrestin1与AP2α结合分子的解析
3.3.1 磷酸肌醇影响dMPPE与Arrestin1及 AP2α的结合
3.3.2 Arrestin1和磷酸肌醇结合
3.4 dMPPE影响norpA和trp突变体的视网膜退化
3.4.1 dMPPE介导norpA突变体中Rhodopsin的内吞
3.4.2 dMPPE的缺失抑制norpA和trp突变体中视网膜退化
3.4.3 dMPPE不影响Arrestin2的转位
3.4.3 dMPPE不影响Rhodopsin-Arrestin2复合物的形成
3.5 结论
3.6 讨论与展望
参考文献
致谢
作者简介
个人简介
科研成果
获得奖项
参加会议
东南大学;
