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嵌合IBDV B细胞表位的PCV2b病毒样颗粒的制备及其免疫活性

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提 要

中英文缩写词表

第一章 绪 论

1.1 嵌合型病毒样颗粒概述

1.1.1嵌合型病毒样颗粒的构建方法

1.1.2 嵌合型病毒样颗粒研究的发展现状

1.1.3 增强嵌合型病毒样颗粒免疫效应的方法

1.1.4 嵌合型病毒样颗粒的应用领域

1.2 大肠杆菌表达系统概述

1.2.1 大肠杆菌表达系统的特点

1.2.2 大肠杆菌表达外源性蛋白的影响因素

1.3猪圆环病毒(Porcine circovirus,PCV)概述

1.4传染性法氏囊病毒(Infectious bursal disease virus,IBDV)概述

第二章 材料方法

2.1 实验仪器和材料

2.1.1 实验仪器

2.1.2 实验试剂名称

2.1.3 质粒及菌种

2.1.4 实验动物

2.2 实验方法

2.2.1 生物信息学分析

2.2.2 引物的设计与合成

2.2.3 表达质粒的构建

2.2.4 Bepi-Cap 的表达及纯化

2.2.5 传染性法氏囊病毒的扩增

2.2.6 蛋白质免疫印迹实验及斑点杂交

2.2.7 体外透析法组装病毒样颗粒

2.2.8 透射电镜样品的制备

2.2.9 间接 Elisa 法检测抗体水平

2.2.10 流式细胞术检测免疫细胞

2.2.11 统计学分析

第三章 结 果

3.1 传染性法式囊病毒衣壳蛋白B 细胞表位(IBDV-Bepi)的预测及筛选

3.1.1 IBDV衣壳蛋白(IBDV-Cap)四级结构的模拟

3.1.2 IBDV-Cap 二级结构的分析

3.1.3 IBDV-Cap 线性 B细胞表位的预测

3.2 猪圆环病毒衣壳蛋白(PCV2b Cap)上被IBDV-Bepi 替换肽段的选择

3.3 嵌合蛋白 (Bepi-Cap)在大肠杆菌中的表达及其纯化

3.3.1 IBDV-Bepi 密码子的优化

3.3.2 表达质粒(pET28a-BepiCap)的构建

3.3.3 Bepi-Cap 的小量表达及其工程菌的高密度培养

3.3.4 Bepi-Cap 的纯化

3.3.5 Bepi-Cap 的鉴定

3.4 嵌合型病毒样颗粒(Bepi-Cap-VLP)组装方式的研究

3.4.1 Bepi-Cap 在菌体内组装为 Bepi-Cap-VLP 的研究

3.4.2 体外透析组装 Bepi-Cap 时组装液成分的研究

3.5IBDV-Bepi 串联多肽(4T-7B)的制备及传染性法式囊病毒(IBDV)的扩增

3.5.1 4T-7B 编码基因的构建及其在大肠杆菌中的表达

3.5.2 IBDV的扩增

3.5.3 扩增的IBDV(SI、WI)的鉴定

3.6 Bepi-Cap-VLP免疫活性的检测

3.6.1 Bepi-Cap-VLP 中IBDV-Bepi 的鉴定

3.6.2 Bepi-Cap-VLP 诱导小鼠产生抗体水平的检测

3.6.3 Bepi-Cap-VLP 在体内对淋巴结免疫细胞的影响

3.6.4 Bepi-Cap-VLP 对法式囊细胞的影响

第四章 讨 论

结 论

创新点

参考文献

作者简介及在学期间所取得的科研成果

致 谢

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著录项

  • 作者

    孙晓萌;

  • 作者单位

    吉林大学;

  • 授予单位 吉林大学;
  • 学科 免疫学
  • 授予学位 硕士
  • 导师姓名 于永利;
  • 年度 2020
  • 页码
  • 总页数
  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 S85R39;
  • 关键词

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