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OGT1催化的NSL3 Thr755位点的O-GlcNAc糖基化修饰对组蛋白乙酰基转移酶复合物MOF/NSL全酶活性的调控机制

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英文缩略词表

第一章 绪论

1.1 表观遗传学概述

1.2 表观遗传学的分子调控机制

1.2.1 DNA的甲基化修饰

1.2.2 组蛋白修饰

1.2.3 染色质重塑

1.2.4 非编码 RNA的调控

1.3 组蛋白乙酰化与 MOF/NSL 复合物

1.4 OGT 与 O-GlcNAc 糖基化修饰

1.4.1 OGT的结构与细胞内存在形式

1.4.2 OGT与 OGA

1.4.3 OGT对非组蛋白底物的修饰与生物学功能

1.4.4 OGT对组蛋白底物的修饰与生物学功能

1.4.5 OGT与疾病的关系

1.5 泛素化修饰与蛋白酶体水解

1.6 NSL3 研究进展

1.7 研究背景与立题依据

第二章材料与方法

2.1 实验材料

2.1.1 实验试剂

2.1.2 实验仪器

2.1.3 实验抗体

2.1.4 质粒

2.1.5 细胞株

2.2 实验方法

2.2.1 细胞培养

2.2.2 瞬时转染

2.2.3 构建稳定表达细胞株

2.2.4 siRNA 基因敲低

2.2.5 昆虫细胞蛋白表达纯化

2.2.6 in vitro O-GlcNAc 糖基化实验

2.2.7 细胞总 RNA提取

2.2.8 反转录(cDNA合成)

2.2.9 PCR 扩增目的片段

2.2.10 免疫共沉淀

2.2.11 免疫印迹(western blot)

2.2.12 平板克隆形成

2.2.13 免疫荧光染色

2.2.14 蛋白质谱

2.2.15 数据处理分析

第三章实验结果与分析

3.1 OGT1 通过对 NSL3 进行 O-GlcNAc 糖基化修饰调控其泛素化降解

3.1.1 引言

3.1.2 OGT1影响 NSL3的泛素化修饰水平

3.1.3 NSL3发生 O-GlcNAc 糖基化修饰的部位在 C端

3.2 泛素结合酶 UBE2S 直接与 NSL3发生相互作用

3.2.1 引言

3.2.2 泛素结合酶 UBE2S与 NSL3 相互结合,而非 UBE2N

3.2.3 泛素结合酶 UBE2S广泛地结合于 NSL3 上

3.3 OGT1 对 NSL3 的 O-GlcNAc 糖基化修饰调控 UBE2S 介导的NSL3泛素化降解

3.3.1 引言

3.3.2 OGT1通过抑制 UBE2S与 NSL3相互作用调控 UBE2S 介导的 NSL3 泛素化降解

3.3.3 OGA增强 UBE2S与 NSL3的结合促进 UBE2S介导的 NSL3泛素化降解

3.3.4 OGA抑制剂 TMG抑制 UBE2S介导的 NSL3 泛素化降解

3.4 OGT1 介导的 NSL3 Thr755 位点 O-GlcNAc 糖基化修饰影响NSL3泛素化降解

3.4.1 引言

3.4.2 NSL3上的 O-GlcNAc 糖基化修饰主要位点为 Thr755

3.4.3 NSL3 Thr755 位点的糖基化修饰影响其泛素化降解

3.5 NSL3 Thr755 位点 O-GlcNAc 糖基化修饰影响 MOF/NSL复合物的全酶活性与稳定性

3.5.1 引言

3.5.2 NSL3上 Thr755 位点的 O-GlcNAc糖基化修饰调控 MOF/NSL复合物的全酶活性

3.5.3 NSL3 Thr755 位点 O-GlcNAc 糖基化修饰影响 MOF/NSL 复合物的全酶

3.6 OGT1 介导的 NSL3 Thr755 位点糖基化修饰调控 A549细胞的增殖能力

3.6.1 引言

3.6.2 OGT1介导的NSL3 Thr755位点O-GlcNAc糖基化修饰调控A549细胞的增殖

第四章总结讨论与展望

4.1 实验结果总结讨论

4.2 后期展望

参考文献

作者简介及博士期间获得的科研成果

致谢

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著录项

  • 作者

    赵琳红;

  • 作者单位

    吉林大学;

  • 授予单位 吉林大学;
  • 学科 生物化学与分子生物学
  • 授予学位 博士
  • 导师姓名 蔡勇;
  • 年度 2020
  • 页码
  • 总页数
  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 O62R33;
  • 关键词

  • 入库时间 2022-08-17 11:22:16

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